离子色谱法在食品分析中的应用研究(21)

色谱法

第二部分研究报告

准确称取氟化钠０．２２１０ｇ，氯化钠Ｏ．１６４８ｇ，溴化钠０．１２８８ｇ，亚硝酸钠Ｏ．１４９９ｇ，硝酸钠０．１３７１ｇ，磷酸钠０．１７２６ｇ，无水硫酸钠Ｏ．１４７９ｇ，分别溶于１００ｍＬ容量瓶中，配制成１０００ｍｇ／Ｌ标准储备液。准确称取草酸、苹果酸、富马酸、阿拉伯糖、半乳糖、葡萄糖、甘露糖和果糖标准样品０．１０００ｇ，分别溶于１００ｍＬ容量瓶中，配制成１０００ｍｇ／Ｌ标准储备液。

用移液管分别移取标准储备液，配制Ｆ‘浓度为１．Ｏ、２．Ｏ、５．０、１０．０、１５．０ｍｇ／Ｌ，Ｃｌ‘、Ｂｆ、Ｎ０２。、Ｎ０３。浓度为２．０、５．０、１０．０、１５．０、２０．０ｍｇ／Ｌ，Ｐ０４弘、８０４２‘、草酸浓度为５．Ｏ、１０．Ｏ、２０．Ｏ、４０．Ｏ、６０．０ｍｇ／Ｌ，富马酸、苹果酸浓度为１０．０、２０．０、３０．Ｏ、４０．０、５０．０ｍｇ／Ｌ的五组混合标准溶液。用移液管分别移取标准储备液，配制阿拉伯糖、半乳糖、葡萄糖、甘露糖浓度为２．０、５．０、１０．０、２０．０、３０．０ｍｇ／Ｌ和果糖浓度为４．０、１０．０、２０。０、３０．０、４０．０ｍｇ／Ｌ的五组混合标准溶液。

１．２．３样品处理：

采用超声辅助水提取的方法，将中草药粉碎，在６０℃烘箱中干燥６ｈ。准确称取Ｏ．２０ｇ，置于烧杯中，加入超纯水２０ｍＬ，超声提取３０ｍｉｎ，放置室温，定容至２５ｍＬ，用Ｏ．４５

２结果与讨论ｕｍ微孔滤膜过滤后渗析进样。

２．１色谱条件的选择

分析阴离子和有机酸时，选择Ｎａ２Ｃ０３和ＮａＨＣ０３混合溶液作淋洗液。丙酮溶液作有机改进剂。调节淋洗液浓度，发现淋洗液浓度越高，洗脱和检测时间越短，导致Ｆ’、Ｃｌ－峰无法分离；淋洗液浓度越小，洗脱和检测时间越长，有机酸保留时间延长，峰形变宽。流速的增加使系统压力显著增大，各离子的保留时间明显缩短，同时造成基线不稳定，本实验选取１．８ｍｍｏｌ／ＬＮａ２Ｃ０３、１．７ｍｍｏｌ／ＬＮａＨＣ０３和２％丙酮混合溶液作淋洗液，流速为０．８ｍＥ／ｒａｉｎ，整个分析过程在１８ｍｉｎ内完成。

ＨＰＡＥＣ．ＰＡＤ分析糖类时，一般采用ＮａＯＨ溶液和醋酸盐溶液作淋洗液。分离半乳糖、葡萄糖和甘露糖等差向异构体和位置异构体时，流动相浓度低于２０ＩＩｍｏ儿【１２３】。降低淋洗液ＮａＯＨ浓度到１５ｍｍｏｌ／Ｌ时，半乳糖峰和葡萄糖峰仍未完全分开，继续降低ＮａＯＨ浓度，通过对比发现在ＮａＯＨ浓度不断降低时，保留时间也相应延长。由于脉冲安培检测器是在碱性条件下（ｐＨ＞１２）的电化学响应下实现的，所以低浓度ＮａＯＨ为流动相时每次进样前色谱柱需要再生处理，需要柱后加入浓碱（２００ｍｍｏｌ／ＬＮａｏＨ）以提高被测物的灵敏度。实验中加入ＮａＡｃ来增加分离的选择性，但是效果并不明显。当ＮａＯＨ浓度为１０ｒｅｔｏｏｌ／Ｊ＂“ｆ，５种单糖峰分