第五章 酶类药物(2)

①酶的原材料的选择和预处理。

②酶的提取与纯化。

③酶活性的测定和纯度检测。

一、酶类药物的原料选择

酶作为生物催化剂普遍存在于动植物和微生物中，可直接从生物体分离获得。酶可以通过化学合成法合成，但由于各种因素的限制，目前药用酶的生产主要是直接从动植物种提取、纯化和利用微生物发酵生产。 近10多年来，动植物细胞培养技术取得了很大的进步，但因为周期长，成本高等问题，实际应用还有一定困难。目前工业大规模生产一般都是以微生物为主要来源

（一）动物类或植物类原料

1、选用材料注意事项：

（1）选择含有效成分高的动、植物及不同的器官和组织。提取不同的酶，原料选择有很大的区别

（2）注意不同生长发育情况及营养状况。动物与年龄、性别和饲养条件有关，植物注意生长的季节，选择最佳采集时间。

（3）原料来源丰富、易得。

（4）提纯步骤简便易行。动物去结缔和脂肪组织，冷冻储存，植物，择时采集，并就地去除不用部分，有用部分保鲜处理。原料储存法有：冷冻法、有机溶剂脱水法、防腐剂保险等。

2、动物材料的预处理

（1）机械处理 （2）反复冻融

（3）丙酮粉组织经过丙酮迅速脱水干燥制成丙酮粉，不仅可以减少酶的变性，同时因细胞结构成分的破碎使得蛋白质与脂质结合的某些化学键打开，促使某些结合酶释放到溶液中。

3、微生物的预处理

要是胞外酶，则除去菌体后再直接从发酵液中吸附提取酶。但对胞内酶则需要将菌体细胞破壁，制成无细胞的悬浮液后再行提取。

（1）干燥法：空气干燥、真空干燥、冷冻干燥

（2）机械法：研磨法、组织匀浆、超声波法、高压匀浆法

（3）酶法处理

（二）微生物发酵法生产酶类药物

1、微生物酶制剂高产菌株的选育

（1）酶制剂生产菌的要求：

①产酶量高，酶的性质应符合使用要求；

②不是致病菌，不产毒素；