转基因大豆 ELISA方法定量检测抗农达® (Roundup Ready®)19 

流程图

实验样品和参照标准抽提流程

程序

称量

加缓冲液

混匀 体积/质量 0.5 g 4.5 ml 说明 称量试验样品、空白、参照标准 加入抽提缓冲液 实验样品与抽提缓冲液充分混匀

以5000 rpm将样品离心15 min，吸取上清

离心 5000 rpm

到另一干净离心管中

稀释 根据不同基质以稀释实验样品和参照标准 1:300或1:10稀释

ELISA实验流程

程序

加样

温育

洗涤

加样

温育

洗涤

加样

温育

加样

测量吸光

值 体积 100 µl 100 µl 100 µl 100 µl 说明 微量移液器吸取已稀释的实验样品、参考标准的抽提液和空白至相应酶标孔 37℃温育1 h 用洗脱缓冲液洗涤3次 向每个酶标孔中加入偶联抗体 37℃温育1 h 用洗脱缓冲液洗涤3次 向每个酶标孔中加入显色底物 室温温育10 min 向每个酶孔中加入终止液 用酶标仪测量每孔在450 nm的吸光值

食品中转基因成分检测 第12章