转基因大豆 ELISA方法定量检测抗农达® (Roundup Ready®)16 

当检测开始后，所有的步骤都应该连续进行而不能中断。

加样

加100 µl稀释的提取液和检测空白到对应的孔内。

每次移液使用一次性枪头以避免交叉污染。

使用胶带或铝箔封住酶标板，以免污染和蒸发。

样品温育

37℃，微量滴定板温育1 h。

洗脱

用300 µl洗脱缓冲液洗脱酶标板3次。 人工洗涤：将酶标板翻转，倒出微孔内液体。用装有洗涤工作液的500 ml洗瓶，将每孔注满洗涤液，保持60 s，然后翻转，倒掉洗涤液。如此重复操作3次。在多层纸巾上将酶标板倒拍数次，以去除残液和泡沫。

用胶带将酶标条固定以免滑落。 自动洗涤：温育完毕，用微量清洗器将所有孔中的液体吸出，然后在每孔内加满洗脱缓冲液。如此重复3次。最后，用微量清洗器吸出所有孔中洗脱液，在多层纸巾上将酶标板反放拍干，以去除残液和泡沫。

在此过程中，不要让酶标孔全干，否则会影响分析结果；

不管是人工洗涤还是自动洗涤，应确保每一孔用相同体积的洗脱液洗涤，不充分地洗涤会导致出现错误的结果。

加入偶联抗体

向每个孔加入100 μl偶联抗体工作液

盖上盖子防止污染和蒸发

温育

食品中转基因成分检测 第12章