转基因大豆 ELISA方法定量检测抗农达® (Roundup Ready®)15 

开始检测前，用大豆检测缓冲液按照表1所列比例稀释样品和参考标准抽提物。 蛋白抽提物于2~8℃贮存，时间不超过一个工作日。

表1. 不同基质的稀释范围

基质 稀释

大豆 1:300

大豆粉

脱脂豆粉 1:300 1:300

蛋白抽提物 1:10

样品抽提物的稀释

对于抽提的阴性对照、阳性对照和样品的稀释需要用到两个12×75 mm的实验管完成。

吸取280 µl大豆检测缓冲液到其中的一个12×75 mm实验管。

吸取380 µl大豆检测缓冲液到另一个12×75 mm实验管。将280 µl的实验管标记为“1:15”，将380 µl的实验管标记为“1:300”。

每个样品吸取20 µl到标记为“1:15”的实验管，涡旋混匀。

从标记为“1:15”的检测板吸取20 µl到标记为“1:300” 的检测板，涡旋混匀。 同样的方法稀释阴性对照、阳性对照和样品抽提物。

ELISA操作程序

概述

ELISA检测试剂盒可以以不同的形式在8孔检测条上使用。建议使用随机加样方案。 所有的反应孔都应重复两次，然后计算其吸光值的平均值。每个程序都要包括分析缓冲液空白、阴性对照和阳性参照标准。

食品中转基因成分检测 第12章