转基因大豆 ELISA方法定量检测抗农达® (Roundup Ready®)14 

从铝箔包装袋中取出包被的酶标条和酶标条固定架，每次取出适量的酶标条后重新密封包装袋。检测条上的十个孔是用来做参照标准和空白对照的。每快板都应有一个标准和对照。如果使用手动清洗，将酶标条的边缘用胶带粘到固定架上以防止在清洗时检测条会突然掉下来。

偶联抗体的制备 偶联抗体储备液：从大豆偶联试剂瓶 (Soya Conjugate bottle) 中吸取1 ml的大豆偶联稀释液 (Soya Conjugate Diluent) 到大豆偶联连接液 (Soya Conjugate vial) 中，旋转混合大约10 s。 偶联抗体工作液：吸取240 µl重构大豆偶联液 (reconstitute Soya Conjugate) 到大豆偶联稀释液瓶 (Soya conjugate Diluent bottle) 中。标记日期，翻转混合20次。

洗脱缓冲液的制备

将10×的洗脱缓冲液回复到室温。

用去离子水稀释10×的洗脱缓冲液，制备成为洗脱缓冲工作液 (例如：50 ml的10×洗脱缓冲液加入到450 ml去离子中)。

将洗脱缓冲液工作液加入到自动清洗仪或洗瓶中。

样品和参考标准的抽提

实验样品、阴性及阳性参照标准品在相同条件下抽提，每个两次重复，可描述如下。 样品称量时，按照浓度由低到高的顺序先称取参照标准，然后是实验样品。

每一种参考标准和样品称取0.5 g±0.01 g，分别放入15 ml聚丙烯离心管中。为避免污染，每次称量前要擦净抹刀。

向每个离心管中加4.5 ml大豆抽提缓冲液，旋涡混合10 s。

5000 rpm离心15 min。

用移液器小心吸取上清液于另一干净的15 ml聚丙烯离心管中，并做标记，不要吸到粒子物质。

食品中转基因成分检测 第12章