农杆菌介导的大豆子叶节非组织培养遗传转化体(6)

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植物遗传资源学报13

卷

图3

Fig.3

冀豆16号T0转基因植株的PCR检测

DetectionofT0transgenicplantsofJidou16byPCR

M：200bpDNAladder；P：pCAMBIA3301质粒（阳性对照）；CK：非转基因植株（阴性对照）

A：用GUS引物对GUS基因片段进行PCR扩增。2、4、6-9为GUS阳性转基因植株，1、3和5为GUS阴性转基因植株B：用Bar引物对Bar基因片段进行PCR扩增。1、3-10为Bar阳性转基因植株，2和11为Bar阴性转基因植株M：200bpDNAladder；P：pCAMBIA3301plasmid（positivecontrol）；CK：non-transformedplant（negativecontrol）

A：GUSgenesegmentamplifiedusingGUSprimer.2，4，6-9：GUS-positivetransgenicplants；1，3，5：GUS-negativetransgenicplants3-10：Bar-positivetransgenicplants；2，11：Bar-negativetransgenicplantsB：BargenesegmentamplifiedusingBarprimer.1，

2.3

PCR冀豆16号T1转基因植株的PCR及RT-检测性植株。3株PCR阳性植株经草铵膦筛选后均表现

抗性，表明目的基因已在大豆基因组中得到稳定

收获上述10株T0PCR阳性植株的种子27粒，遗传。

播种后即T1转基因植株。提取其叶片基因组DNA提取上述3株T1转基因植株的总RNA，进行转

PCR结果如图4，3株转基后同样用GUS引物和Bar引物分别对GUS基因片段录水平的分子检测。RT-和Bar基因片段进行PCR扩增。结果显示，只有3

株用两对引物均能扩增得到对应的GUS和Bar基因片段，为阳性植株；其他植株均没有扩增出条带，为阴

因植株中都分别扩增得到了Bar基因片段（300bp）

和GUS基因片段（900bp），表明目的基因已在转录水平进行了表达

。

图4

Fig.4

PCR检测冀豆16号T1转基因植株的RT-

DetectionofT1transgenicplantsofJidou16byRT-PCR

M：200bpDNAladder；P：pCAMBIA3301质粒（阳性对照）；CK：非转基因植株（阴性对照）；

1-3：T1阳性转基因植株（左：Bar引物扩增；右：GUS引物扩增）

M：200bpDNAladder；P：pCAMBIA3301plasmid（positivecontrol）；CK：non-transformedplant（negativecontrol）；

1-3：T1positivetransgenicplants．Left：amplifiedwithBarprimer；Right：amplifiedwithGUSprimer