矮牵牛组织培养(4)

并在该培养瓶上标注组号。

表1 1/2MS用的元素量

表2 生长因子的用量

2．培养基和接种工具灭菌

首先将内层锅取出，在向外层锅中加入适量水，使水面与三脚架向平，加水量不能过少，以防止灭菌锅底烧干而引起炸裂事故。放回内层锅，并装入培养基和接种工具，不要装的太挤，以免妨碍蒸汽流通过而影响灭菌效果。三角瓶与试管口不要与筒壁接触，防止冷凝水淋湿包口的纸而透入棉底。加盖，并将盖上的排气软管插入内层锅的排气槽内，以两两对称的方式同时旋紧相对的两个螺栓，使螺栓松紧一致，勿使漏气。插上电源，同时打开放气阀，使水沸腾以排尽锅内的空气，待冷空气排尽后，关上放气阀，让锅内的压力升到所需压力0.1MPa。（121.5℃），控制热源，维持压力至所需时间20min。达到灭菌时间后，切断电源，让灭菌锅内的温度自然下降，当压力将至0时，打开放气阀，旋松螺栓，打开盖子，取出灭菌物品。将取出的灭菌培养基在室温下放置一周，经检查没有杂菌生长即可使用。

3．外植体的接种、培养和观察记录

3.1接种