矮牵牛组织培养(3)
时间:2025-04-30
时间:2025-04-30
实验用品:
1. 试剂
大量元素I (扩大10倍):KNO3、NH4NO3、MgSO4·7H2O、KH2PO4
大量元素II (扩大40倍):CaCL2
微量元素I(扩大100倍):MnSO4·H2O、ZnSO4·7H2O、H3BO3、KI
微量元素II(扩大200倍):NaMoO4·2H2O、CuSO4·2H2O、CoCL2·6H2O 铁元素(扩大100倍):Na2-EDTA、FeSO4·7H2O
有机元素(扩大100倍):甘氨酸、盐酸硫胺素VB1、盐酸吡哆醇VB6、烟酸
VB3、肌醇(单独配置)
生长因子:0.2mg/ml NAA、0.5mg/ml IBA
琼脂 蔗糖等均为分析纯 1mol/L NaOH溶液
(注:以上MS培养基母液以及生长因子由实验室配置好)
2.器具
电子天平、冰箱、PH试纸、烧杯、玻璃棒、量筒、试剂瓶、三角瓶、洗耳球、微量加样器、高压蒸汽灭菌锅、微波炉、培养瓶、超净工作台、各种接种器具。
实验步骤:
1.生根培养基的配制
称取琼脂1.5g,放置于250mL烧杯中,加入120mL蒸馏水,放入微波炉中加热至溶解。取用另一只烧杯,按照表1所需求的量配制1/2MS培养基,并向其中分别添加0.2mg/ml IBA和0.5mg/ml NAA量如表2所示,然后再加入蔗糖6g。将稀释的母液与琼脂溶化液混合,定容至需要的容积至200mL,待温度降至50--60℃,调节pH至5.8,以30—40ml/瓶分装在培养瓶中,用封口膜封口,
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