蔬菜食品中铁含量的测定(5)

1.综合运学习样品的与处理方法2.了解722型分光光度计的构造和使用方法3.学会对实验最佳条件选取的讨论4.练习灵活运用各种基本操作的能力和查阅资料的能力

的条件下Fe 离子与邻二氮杂菲生成稳定的橘红色络合物。

在显色前，首先用盐酸羟胺把 Fe离子还原为 Fe离子，其反应式如下：

3+

2+

2+

2 Fe3++2NH2OH·HCl→2 Fe2++N2+2H2O+4H++2Cl-

测定时，控制溶液酸度在pH=5左右较为适宜。酸度过高，反应进行较慢；酸度太低，则 Fe离子水解，影响显色。

2+

【实验仪器】

1.主要仪器与设备：722型分光光度计，马福炉，电热炉，容量瓶（50ml)10个， 容量瓶（100ml）1个，容量瓶（500ml）一个，移液管（5ml)3个，移液管普（10ml）1个，电子天平，烧杯2个，比色皿，漏斗及漏斗架，试剂瓶4个等。

2.试剂：20ug/ml 铁标准溶液，0.2%邻二氮杂菲溶液 ，10%盐酸羟胺溶液，1mol/L NaAc 溶液，8mol/LNaOH溶液， 0.4 mol/L NaOH溶液， 1：1 HCl溶液 3.实验用品：油菜，鸡蛋黄

【实验步骤】 一.样品处理：

1.取新鲜油菜，捣碎称取90，置于蒸发皿中，在通风处中小火加热，直至不再冒烟为止，然后将其放入马弗炉内灰化（约一天一夜），去处冷却后，加入1：1的盐酸，如果不完全溶解，小火加热使其全部溶解，若再不溶解，加入2~3ml硝酸，使其溶解，调PH值，然后过滤，移入50ml的容量瓶中。定容，摇匀，备用。

2.取鸡蛋黄称重19.2g。置于蒸发皿中，捣碎，在通风处中小火加热，直至不再冒烟为止，然后将其放入马弗炉内灰化（约一天一夜），去处冷却后，加入1：1的盐酸，如果不完全溶解，小火加热使其全部溶解，若再不溶解，加入2~3ml硝酸，使其溶解，调PH值，然后过滤，移入50ml的容量瓶中。定容，摇匀，备用。

二.条件试验：

1.最佳波长的测定：

准确移取5ml 20ug/ml铁标准溶液于50ml容量瓶中，加入1ml 10% 盐酸羟胺溶液，摇匀，冷却，稍等，加入5ml 1mol/L NaAC 溶液和3ml 0.2%邻二氮杂菲溶液，定容，摇匀。在722型分光光度计上用1cm比色皿，以水为参比溶液，用不同波长450—570 nm,每隔10nm测吸光度，并绘制吸光度——波长曲线找出最佳波长区间。