生物分析化学作业(7)

正曲线，如表2所示。所有的校正曲线的线性范围都是10.4–60μgmL 1，线性系数为(R2)≥0.999。

检测限(LOD) 和定量限(LOQ)指的是性噪比分别为3:1 和10:1的化合物浓度。它们是通过在UHPLC–MS条件下连续稀释样品溶液来确定的。结果如表2所示。

3.5.2 回收率和精确度

采用标准加入法来检测回收率。十五份婴儿奶粉（每个浓度水平五份）被加入低、中、高含量的每种标准蛋白，额外的三份选作控制。样品采用2.5部分的方法预处理，结果总结如表3所示。所有的回收率在94.0–98.7%范围内。

每个化合物在低、中、高浓度水平的日内和日间精确度如表4显示。日内RSDs在2.5–10.0%范围内，日间RSDs在3.3–11.1%范围内。

3.5.3 重现性

UHPLC–MS的重现性研究采用通过分析11种内标婴儿奶粉对MS响应变化来确定。RSDs小于5.7%。

3.6 方法应用

采用上面的分析方法，作者随机分析了24家不同厂家的婴儿奶粉。婴儿奶粉的乳清蛋白提取物的UHPLC–MS结果如图4所示。

不同样品中的其他三种乳清蛋白也采用了上诉方法进行检测，结果如表5所示。三种乳清蛋白中，牛α-La含量最高。这也许是因为其营养价值和生物活性，人工加入了富含牛α-La蛋白质成分。所有的样品中都含有β-Lg（β-Lg A和β-Lg

1B），含量在46.4 到 640.3 mg kg

范围内。这似乎使得经常喝这些奶粉的婴儿具有很高的过敏风险。

不同厂家的乳清蛋白含量也明显不同。其中最高含量是993.8 mg kg 1，而最低含量只有80.7 mgkg 1。造成这些不同的最可能的两个原因是：（1）不同的加工过程（巴氏杀菌，超高温度，微波）会导致不同的蛋白质变化，反过来又影响原始蛋白质的含量。（2）因为牛α-La的从成本很高，也许会是的人工加入的量显著不同。由于婴儿奶粉的营养和生物活性与原始乳清蛋白的含量直接相关，上诉同时检测主要乳清蛋白来评价不同婴儿奶粉营养价值优劣收到特别关注。