生物工程

图1 碱性蛋白酶工艺流程图

2.3.3 工艺流程说明

首先培养基经过预处理进行灭菌、均质，待温度降到37℃。将培养基分别

加入到种子罐和发酵罐内进行发酵，通风搅拌24h。放罐后直接对发酵液进行

双水相萃取，经过两次萃取后获得纯的酶液，最后对酶液进行冷冻干燥，便制

得产品。

2.3.4分离纯化流程

1. 双水相萃取

萃取原理:将亲水性聚合物加入水中会形成两相。聚合物以不同的比例分配

与这两相中，而水分在每一相中都会占很大的比例(85%-95%)，生物蛋白质等

在这种体系中能够保持自然活性。

当两种聚合物的水溶液相互混合时，究竟是分层成两相，还是混合成一相，

取决于两种因素，一是混合熵的变化，二是分子间的作用力。对大分子而言，

则分子间的作用力占主导地位，也就是说，由分子间的作用力决定混合的结果。

若两种聚合物的分子间存在斥力，那么再某一分子的周围就可能系同种分

子而非异种分子。当达到平衡后则分成两相，两种聚合物分别进入到每一相中，

达到分离的目的。反过来，如果两种聚合物之间存在引力，如在带相反电荷的