周厚庆等: Raf-1激酶与肿瘤治疗1165

可以诱导Raf-1有条件消融, 进而导致已有肿瘤通过MEK/ERK依赖性激活一个分化程序[37](图2)。

失败后, 以Raf蛋白家族及其下游效应器为靶点的药物研发逐渐成为人们研究的重点。药物研发采用如下策略: 采用小分子抑制剂来抑制Raf激酶的活性; 或者利用反义寡核苷酸来减少Raf蛋白的表达水平; 或者以Raf蛋白与其他蛋白之间的相互作用为目标, 尤其是Raf-Ras之间相互作用。第一个研发出来的药物就是Raf-1的抑制剂, 随着B-Raf激活的突变体在肿瘤中越来越多地被发现, 人们也开始致力于研发B-Raf和MEK1/2的抑制剂。

3.2.1 Raf激酶抑剂(表1) 索拉非尼(BAY 43-9006)是第一个通过临床试验的Raf抑制剂。临床前试验显示, 在肿瘤细胞株以及Ras激酶依赖型肿瘤的异种移植模型中, 索拉非尼能显著抑制Raf-1和B-Raf的活性[43-44]。进一步研究表明, 索拉非尼可以用于治疗晚期肾细胞癌(renal cell carcinoma, RCC)以及原发性肝癌(hepatocellular carcinoma, HCC)。然而, 索拉非尼单体或联合用药对于黑色素瘤尤其是携带B-Raf突变的恶性黑色素瘤的临床治疗效果不是很理想[45-46]。索拉非尼作为一种特异性的Raf-1激酶抑制剂被研发, 尽管其对突变的B-Raf不能充分抑制, 但它对血管内皮生长因子(vascularendothelial growth factor, VEGF)和血小板衍生生长因子(platelet derived growth factor, PDGF)受体激酶具有高度抑制效应[47]。索拉菲尼作为二线抗肿瘤药物, 正在进行大规模多中心临床试验, 尽管临床试验取得了较好的临床效果, 然而如何发挥该药物的最大疗效尚不明确。

AZ628是野生型Raf-1和V600E B-Raf的选择性抑制剂。在许多细胞中, 尤其是在含有V600E B-Raf

3 以Raf-1为靶点的肿瘤治疗的相关研究

3.1 癌症中的raf-1基因突变

Raf作为Ras的关键下游效应因子参与肿瘤的发生和发展。Raf激酶家族成员Raf-1在肿瘤的发生与发展中的作用一直是人们研究的主要目标。与癌症相关的Raf-1突变体, 如S247G突变体和E478K突变体, 也已经被广泛报道。它们先后在化学药剂诱导的大鼠肺癌模型、人肿瘤细胞株以及人急性髓细胞样白血病(therapy-related acute myeloid leukemia, t-AML)中被报道[37]。在人t-AML病人中, raf-1基因突变率很高, 但raf-1突变只表现出轻微的促进癌细

胞转化能力。通过对t-AML病人的ERK通路的激活情况分析发现, 只在恶性肿瘤组织中检测到raf-1突变, 而在周围正常组织中没有检测到raf-1突变。最近报道表明, 在人类黑色素瘤中发现了Raf-1突变体E478k。在体外结肠癌模型中, Raf-1 E478突变体对ras癌基因激活高度敏感。这个突变体功能与B-Raf功能相似, 在胃癌、肺癌和乳腺癌细胞中也发现了Raf-1 jjjjE478k突变体[38]。除了raf-1基因的突变, Raf-1家族成员的其他变异也在人类恶性肿瘤中被报道。B-Raf和raf-1基因重排和融合已经在在甲状腺瘤、纤维性星形细胞瘤、前列腺癌、子宫内膜瘤、黑色素瘤中被报道[38-42]。

3.2 以Raf-1为靶点的癌症治疗

抑制Ras信号以治疗癌症的临床前及临床研究

表1 Raf-1抑制剂

Table 1 Inhibitors of Raf-1

名称 肿瘤 Compound Tumors

Pancreatic cancer, Bladder cancer, Lung cancer,

Neuroendocrine tumors, Thyroid carcinoma, Squamous cell carcinomaLErafAON (NeoPharm, Inc) Advanced malignant tumor ISIS 5132 (Isis Pharmaceuticals) Ovarian cancer, Breast cancer

Dabrafenib Gastrointestinal stromal tumors, Papillary thyroid carcinoma, Non-small cell lung cancer, Ovarian cancer, Colorectal carcinoma AZ628 Melanoma

GW5074 Huntingdon’s disease

ZM336372 Pheochromocytoma, Medullary thyroid carcinoma Hepatocellular carcinoma

PLX-4720 Colon cancer, Renal cell carcinoma, Hepatocellular carcinoma, Melanoma NVP-BHG712 Melanoma, Malignant glioma

CEP-32490 Colon cancer, Medullary thyroid carcinoma