1164·综述·

Stimulus

Bcl-2Rock2ASK1MST2

Inhibit

Apoptosis

Ras

Raf-1Rok-α

Promote

Tumor invasion and

metastasis

MEK

Inhibit

TGFβ

Tumor proliferation and

differentiation

ERK

图2 与肿瘤发生相关的Raf-1信号途径

Fig.2 Tumor-related signalling pathways of Raf-1

接结合来降低Rock2的活性, 从而反馈性地抑制Fas在细胞膜表面的表达, 最终抑制细胞凋亡的发生(图2)。2.1.3 对ASK1激酶和MST2激酶的调控 Raf-1在抑制细胞凋亡过程中其他的作用靶点是促凋亡激酶: 细胞凋亡信号调节激酶1(apoptosis signal-regulating kinase 1, ASK1)和磷酸化蛋白激酶2(mammalian Sterile20-like kinase 2, MST2), Raf-1直接与之结合, 并抑制该激酶的活性。这些抑制效应不需要Raf-1激酶的活性而是通过Raf-1与促凋亡激酶直接结合而介导的。ASK1位于JNK MPAK和p38 MPAK上游, 通过激活死亡受体(如TNF-α、Fas)途径来促进细胞凋亡[26-27]。在人内皮细胞中, Raf-1通过结合并抑制线粒体中ASK1的激酶活性, 抑制细胞凋亡的发生。在大鼠心脏中特异性的敲除raf-1基因, 导致由心肌细胞凋亡增加而引起的心室扩大症和纤维症, 同时, 敲除ASK1能抑制上述症状的发生。以上研究阐明了Raf-1对ASK1的抑制效应的病理生理学意义[28]。

Raf-1与MST2的SARAH结构域结合, 进而干扰了MST2二聚化作用及募集。Raf-1激酶失活的突变体也可以抑制MST2激活。MST2活性在raf-1敲除的细胞中显著提高[29]。这些都表明了Raf-1可以直接与ASK1激酶和MST2激酶结合, 进而抑制它们的活性, 最终发挥抑制细胞凋亡的作用(图2)。

Rok-α的化学抑制剂抑制Rok-α的活性或诱导Rok-α的负调控结构域发生突变, 可以逆转因raf-1敲除而对细胞运动的抑制作用, 该结果表明, 在细胞运动过程中Rok-α是Raf-1的唯一作用靶点[25]。对其机理的研究发现, Raf-1半胱氨酸富集域(CRD)在该过程中起到了至关重要的作用。Rok-α像Raf-1一样, 具有自身抑制活性的特性, 其C端调控区域高度类似于Raf-1的CRD。Raf-1的CRD调控结构域能够与Rok-α激酶结构交联结合, 并抑制Rok-α激酶的活性, 进而促进肿瘤细胞的运动[30]。Raf-1和Rok-α相互作用的生物学相关性在Ras诱导的小鼠皮肤肿瘤模型中得了很好的验证[31](图2)。

2.3 Raf-1抑制肿瘤细胞的增殖与分化

Raf-1可以通过诱导转化生长因子-β(transforming growth factor-β, TGF-β)产生来抑制肿瘤细胞的增殖与分化。TGF-β是一个抑制肿瘤细胞增殖的关键诱导物。许多肿瘤通过下游调控或TGF-β受体突变体来使TGF-β信号转导失效, 或通过使其下游靶点失活, 如视网膜母细胞瘤蛋白Rb, 从而使其迅速增殖[33]。而激活的Raf-1则可以通过诱导TGF-β的产生

来抑制肿瘤细胞的分化和凋亡[34-35]。

此外, Raf-1可以通过Raf/MEK/ERK级联激酶通路参与细胞分化的调节。ERK1/2影响细胞分化可能与M期细胞内微管结构有关[36]。最近研究表明, 在表皮肿瘤中, 内源性Raf-1对于维持表皮肿瘤细胞未分化状态至关重要。激活的的Rho激酶-α(Rok-α)

2.2 Raf-1促进肿瘤细胞的运动

Raf-1可通过下调Rho激酶-α(Rok-α)的活性来促进肿瘤细胞的运动[25]。raf-1敲除的细胞中, 使用