人脐血来源内皮祖细胞的分离、培养及鉴定(7)

时间:2025-02-24

刚舌

我国先天性心脏病的发病率为7‰,每年估计新发病例近20万。目前我国

先天性心脏病的外科治疗病例中约45%需要应用修复材料。目前I临床常用的血管

修复材料主要有两类,即天然血管和人工血管。天然血管包括自体血管和同种异

体血管,其缺点是来源极其有限,对机体造成了新的创伤。人工血管如聚四氟乙

烯,其缺点是因缺乏内膜,易形成血栓;顺应性差,缝合处易撕裂;缺乏生长能

力,需再次手术;再狭窄率20-30%,5年通畅率<20%。故目前临床上仍然缺乏

理想的血管替代物。

组织工程学是一门以细胞生物学和材料学相结合,进行体外或体内构建组织

或器官的新兴学科。1987年由美国研究者首先开始该领域的研究。组织工程构

建的三要素是种子细胞、生物材料和组织构建,其中种子细胞是关键和前提。

组织工程心血管修复材料早期研究的种子细胞主要从机体自身动脉或静脉

获得内皮细胞,细胞来源有限,而且对供体具有创伤性,在小儿尤其新生儿心血

管病例更为困难。更重要的是,来源于成熟血管的内皮细胞多为终末分化细胞,

易老化,扩增数量有限,不能满足血管构建对大量种子细胞的要求。因此寻找初

期分化细胞来源的内皮种子细胞已成为血管组织构建的关键。

干细胞技术的成熟加速了心血管组织工程的发展。内皮祖细胞(endothelial

progenitorcells,EPCs)是血管内皮细胞的前体细胞,有分化为血管内皮细胞的能

力,又称血管母细胞(angioblast)或血管内皮干细胞(endothelialstemcells),1997

年由Asahara!lJ等首次从成人外周血分离,在生后机体的血管新生中起重要作用。

近来大量研究表明骨髓、脐血、外周血、胚胎组织、脂肪组织等中富含内皮祖细

胞,骨髓和脐血中此种细胞的含量和增殖能力远高于外周血12】,在VEGF或缺血

刺激下可以增生、分化为内皮细胞,它在体内具有明显的内皮修复以及促血管新

生作用口1,这提示EPCs有可能作为组织工程血管的种子细胞来源。

胚胎组织的获取和实验存在很多伦理方面的争论,循环血液中EPCs数量稀

少,采集足够数量的EPCs技术上比较困难,脂肪组织中EPCs获取需要手术采集大量脂肪组织,损伤较大。骨髓的获取具有侵入性。因此我们选取了脐血作为

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