人脐血来源内皮祖细胞的分离、培养及鉴定

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对照组诱导组哪ＶＥｃ组

图１１培养ｄ１４细胞培养液中ＮＯ含量测定

讨论

１ＥＰＣｓ的分离方法

由于ＥＰＣｓ的研究仍处于早期阶段，缺乏特有的表面标志，因而目前分离

ＥＰＣｓ有一定的难度。大量胚胎学研究结果表明，造血系统祖细胞与血管内皮祖

细胞来源于共同的干细胞一血液血管干细胞（ｈｅｍａｎｇｉｏｂｌａｓｔ），因而它们具有多种

相同的抗原表达，包括ＣＤ３４、Ｆｌｋ—ｌ、Ｔｉｅ－２、ＶＥＧＦＲ一２等。故至今仍未发现能

同时将ＥＰＣｓ与造血细胞及成熟血管内皮细胞完全区分开的特异细胞表面标志。

ＣＤ３４曾被认为是最重要的造血干细胞的标志物。进一步研究表明，ＣＤ３４不仅

表达在ＨＳＣｓ上，也在成熟的内皮细胞上有低水平的表达。故研究转向代表更早

期的造血干细胞表面标志ＣＤｌ３３。ＣＤｌ３３是新近发现的造血干细胞早期标志，

是分子量为１２０ＫＵ的糖基化多肽，含有５个跨膜结构，是一种早期抗原，它选

择性的在骨髓和外周血造血干细胞及内皮祖细胞表达１４Ｊ，但在成熟内皮细胞上不

表达。研究表明，纯化的ＣＤｌ３３＋细胞在体外能分化为内皮细胞。在分化过程中，

ＥＰＣｓ明显失去ＣＤｌ３３，并开始表达成熟内皮细胞特有的表面标志，如ＣＤ３１、血

管内皮钙粘着素和ｖＷＦ。因此，ＣＤ３４＋／ＣＤｌ３３＋细胞可能是循环中最原始的祖细

胞群，而ＣＤ３４＋／ＶＥＧＦＲ－２＋可能代表血管壁脱落的成熟内皮细胞。目前认为，表

达ＣＤ３４，ＶＥＧＦＲ－２及ＣＤｌ３３的细胞为ＥＰＣ矿Ｊ。１７