蛋白酶产生菌的筛选(3)

时间:2025-02-22

杆菌类产生蛋白酶分解蛋白质。

五、操作步骤

(一) 配制所需培养基 按照以下配方配制所需的培养基

牛肉膏蛋白胨培养基:牛肉膏 0.5g,蛋白胨 1g,NaCl 0.5g,

琼脂 1.5~2.0g,水 100ml,pH 7.2

配制200mL

奶粉培养基:牛肉膏 0.5g,蛋白胨 1g,NaCl 0.5g,

琼脂 2.0g,水 100ml,pH 7.0~7.2 脱脂奶粉 3g,配制200mL

(二) 分离

1.采集土壤样品,用无菌水植被1:10土壤悬液。 2.取1:10土壤悬液5 mL,注入已灭过菌的试管中,将此试管放入75~80℃水浴中热处理10min以杀死非芽孢细菌。 3.取加热处理过的土壤悬液100~200μL,涂布接种到牛肉膏蛋白胨培养平板,后将平板倒置,于30~32℃下培养24~48h.

4.对长出的单菌落进行编号,选择表面干燥、粗糙、不透明的菌落,挑取少许菌苔涂片,做芽孢染色,判断是否为芽孢杆菌。 (三) 筛选

1、从判定为芽孢杆菌的菌落处,分别挑取少许菌苔,先接种奶粉斜面培养基,再转接奶粉培养基平板上,30~32℃下培

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