人参皂甙 Rh2对人乳腺癌MCF7AdrR细胞增殖和凋亡的(4)

人参皂甙 Rh2对人乳腺癌MCF7AdrR细胞增殖和凋亡的影响

24 48 72

Con trol 0 0 0

T rial

20 0 11 0 01# 016 0 01# 0 19 0 01#

40 0 21 0 01# 025 0 00# 0 40 0 00#

80 0 45 0 01# 049 0 02# 0 53 0 02#

160 0 56 0 01# 061 0 02# 0 64 0 00#

320 0 66 0 01# 069 0 01# 0 72 0 01#

Con tro:l Norm al saline; Tria:l D ifference concen trat ion of GS - Rh2; Com

pared w ith con tro,l # P < 0 05

2 荧光染色检测细胞凋亡情况

Hoeehst 33258染色后, 荧光显微镜下可见(图1),

对照组(图1A )的细胞核圆而大, 染色质分布均匀, 表现为弥散均匀的荧光; ADM 组(图1B )与Rh2组(图1C) , 细胞核大部分形态及染色质分布, 与对照组相似;而少量细胞核染色质聚集, 荧光呈颗粒分布, 细胞凋亡核占( 52 14)% , 与对照组比较无统计学差异(P >005)。ADM + Rh2组(图1D)细胞核数目明显减少, 有大量固缩变形的细胞核, 染色质浓缩, 表现为致密浓染的荧光颗粒, 有凋亡小体形成, 尤其ADM与Rh2大剂量

图1 H oechst 33258染色后荧光检测结果

F igure 1 Fluorescence detection o fMCF7/AdrR breast ce ll sta ined w ith

H oechst 33258 sta in ing

ACon trol; BAdriam ycin ( ADM, 1 g# mL- 1 ) ; C GS - Rh2 ( 40 m ol#

L- 1 ) ; DADM ( 1 g# mL- 1 ) + GS - Rh2 ( 40 mo l# L- 1 )

联合用药组, 凋亡最明显; 细胞凋亡核占( 755

26)%, 与对照组比较有统计学差异(P < 001)。

3 流式细胞仪检测细胞凋亡情况对照组细胞凋亡峰低平, Rh2组与ADM 组凋亡峰

高度与对照组接近, 对照组凋亡细胞百分率为( 1451 121)% , Rh2 组为1620% , ADM 组为1520%, Rh2组和ADM 组与对照组比较差异无统汁学意义(P > 005)。

Rh2 + ADM组, 出现明显高尖的凋亡峰, ADM + 3个不同浓度Rh2组, 凋亡细胞百分率分别为2627%,3915%, 4708% , 与对照组比较差异有统计学意义

(P < 001, 表2)。

4 流式细胞术检测细胞周期结果

Rh2组与ADM组与对照组的接近, 细胞周期Rh2组和ADM组与对照组比较差异无统汁学意义( P >005)。ADM + 各浓度Rh2组作用于MCF7 /AdrR 细胞株, 均出现诱导G0 /G1期阻滞, 阻滞细胞由G1期向S期的转化, 随Rh2作用浓度的增加, G0 /G1期细胞含量上升, S期细胞下降, G2 /M 期与对照组比较无明显的变化, 见表3。5 Western blot检测凋亡相关蛋白表达Rh2组和ADM 组的Fas、Bax、Bcl- 2、B cl- x l蛋白表达与对照组比较差异无统汁学意义。ADM + Rh2不同浓度组作用于MCF7 /AdrR 细胞使Fas、Bax 蛋白的表达增高, Rh2浓度为80 mo l# L- 1时, 蛋白表达增高最明显, Bcl- 2蛋白的表达降低, Bc l- x l蛋白的表达在药物作用前后无明显的变化(图2)。

讨 论

肿瘤的发生发展是一种多基因、多步骤、多阶段的复杂过程, 许多抗肿瘤药物都可诱导或促进肿瘤细胞凋亡而发挥治疗作用。本研究证实, 人参中的活性成分人参皂苷- ( GS - Rh2 ) 能抑制人乳腺癌MCF7 /A drR细胞增殖并诱导其凋亡。