南方医科大学 正交试验法优化啤酒花中黄酮成分(6)
发布时间:2021-06-11
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流。其中,1、4、6号为一组,2、8、9号为一组,分别、依次用三孔电热恒温水浴锅对这两组进行冷凝回流;3、5、7号为一组,分别用三
孔电热恒温水浴锅对该组进行冷凝回流。结束后进行抽滤,取滤液备用。
6.5.2 将全部提取液加入100ml容量瓶中,用对应浓度的乙醇溶液定容到100ml,摇匀,从中精密量取6mL,置于25mL烧杯中,加5%亚硝酸钠溶液1 mL,摇匀,放置6分钟,加10%硝酸铝溶液1 mL,摇匀,放置6分钟,加氢氧化钠试液10 mL,摇匀,放置15分钟,转移到25ml容量瓶中,再加相应浓度乙醇至刻度定容。
6.5.3 将上述溶液加入比色杯中,以相应浓度乙醇为空白对照,立即按照分光光度法,在510nm波长处测定其吸光度,并将结果记录入表四中
6.5.4 将提取液置于旋转蒸发装置中,蒸去溶剂即可得黄酮提取物,烘干待用。 6.6 黄酮类化合物抑制血小板凝集性质试验
6.6.1 黄酮的配制:黄酮配为1g/L,取黄酮10毫克,溶解在10毫升的乙醇中,震荡充分溶解,用双层滤纸过滤,备用。
6.6.2 取12只试管,编为6组,每组做同一只大鼠的血清实验,按下表加入试剂
血浆
黄酮溶液 900μl -
乙醇(对应浓度) ADP溶液 - 900μl
100μl 100μl
试管A(实验组) 1ml 试管B(对照组) 1ml
6.6.3 将上述试管置于恒温箱(39摄氏度)中10分钟,然后取出,放到分光光度仪中690nm处测定溶液的透光率,以此来判断血小板的凝集情况。并将结果填到表5中。
7、结果与分析
7.1 正交试验结果分析
根据表 4 的数据计算出各因素的一水平试验结果总和、二水平试验结果总和、三水平试验结果总和,再取平均值(各自被3除)。最后计算极差。极差是指这一列中最好与最坏的之差,从极差的大小就可以看出哪个因素对黄酮含量影响最大,那个影响最小。找出在何种条件下黄酮含量最高。最后作一直观分析的结论。
表4 数据记录及分析
试验号
1 乙醇含量 ( % )
2 料液比
3 提取时间
4 提取温度 /( ℃ )
试验结果 A510nm
( g : ml) ( min )
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