人参皂苷_Rh2抗肿瘤机理的研究进展(2)

第9期 郭志廷等:人参皂苷-Rh2抗肿瘤机理的研究进展743

间的延长而逐渐增加,而在C6Bu-1细胞中, 、 、 、 型的PKC变化不太明显。结果提示,G-Rh2作用

不同的含有或不含有PKC类型的细胞可能经由不同的旁路途径和相互影响来诱导细胞的凋亡。1.2 Caspase和Bc-l2的信号通路

Caspase蛋白家族是一组与细胞因子成熟和细胞凋亡有关的蛋白酶,在肿瘤的信号传导过程中发挥重要作用,通过调节其在肿瘤细胞中的表达水平,可有效提高肿瘤的治愈率。在G-Rh2作用SK-N-BE(2)的早期,p53的量迅速积累,促进细胞发生凋亡。根据结果推断,Caspase-1和Caspase-3的激活及Bax的上调参与了G-Rh2诱导的细胞凋亡

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抑制了端粒酶的活性。这种抑制作用呈时间依赖性关系:处理1d后其活性从1.105降到了0.765(P

<0.01),而处理5d后其活性从1.152降到了0.326(P<0.01);当G-Rh2的剂量达到20 g/mL时,人端粒酶逆转录酶基因(hTERT)的mRNA表达明显降低[11],其作用机理可能是通过影响hTERT的转录水平和捕获细胞周期的某个过程,从而有效降低了端粒酶的活性。目前国内外在这方面的研究较少,设想通过利用G-Rh2抑制端粒酶活性,使肿瘤细胞的端粒长度不能维持而进入衰老并最终死亡,这可能成为治疗肿瘤的新方向。

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3 阻断肿瘤细胞重要成分的合成与代谢

研究证实,在防治肿瘤的过程中,通过阻断肿瘤细胞的某些重要成分的合成或抑制它们的表达是一种有效的抗肿瘤途径。JunN末端激酶1(JNK1)是细胞的重要组成成分之一,具有明显促使肿瘤细胞发生凋亡的作用。Ham等[12]报道,在G-Rh2诱导的SK-HEP-1细胞凋亡过程中,JNK1的活动被迅速上调和延长,而在细胞表达为显性负效的突变体 DN-JNK1或JNK1的一种抑制性蛋白 JBD则被明显地抑制。而且,G-Rh2介导的JNK1的活化在开始10~30min内与SAPK/ERK激酶1(SEK1)的活动有关,而此后持续不变的活化却和SEK1的活动无关[13]。可见,SEK1对于JNK1的活化有着非常重要的作用,但并不存在简单的相关关系。G-Rh2还可以通过诱导p21蛋白质表达和降低细胞周期蛋白D的水平来抑制MCF-7细胞增殖,结果下调了cyclin/Cdk复合激酶的活动,减弱了视网膜神经胶质瘤蛋白(pRb)的磷酸化作用和抑制了E2F的释放[14]。磷脂酶C在抗肿瘤进程中占据重要地位,对于PKC的活化是必需的。G-Rh2可以有效降低磷脂酶C的活性,结果降低了PKC的一种内生性激活剂 甘油二酯在细胞内的水平,从而发挥抗增殖作用[15]。Hyun-Eui等[16]在研究G-Rh2对脑瘤的潜在作用时发现,经G-Rh2处理后,特异性的多聚酶(ADP-核糖)却没有像在其他凋亡试验中出现的那样断裂成85ku的蛋白,Bc-l2和Bax的表达水平也没有发生变化,其过度表达的抗氧化蛋白质Bc-lXl也与亲本细胞相类似。已有研究证实,c-myc是一种致癌基因,在人类很多肿瘤组织中发现有c-myc基因的扩增或高表达。有人报道,G-Rh2还可降低c-myc基因的表达。上述结果表明,G-Rh2主要通过阻断生物反应体系中一些重要酶类的合成与代谢来发挥抗肿瘤作用,按此途径治疗恶性肿瘤,治疗效果一般比较彻底,不易复发。

G-Rh2还可以通过诱导细胞凋亡,抑制离体A375-S2细胞的增殖,其诱导的细胞凋亡部分依赖Caspase-8和Caspase-3的旁路途径[5]。

Bc-l2作为一种信号转导物质,具有抑制多种形

式细胞凋亡的作用,主要通过增加线粒体膜的通透性,使细胞生长停留在G0期,从而达到介导肿瘤细胞信号通路之目的。在G-Rh2处理过的鼠胶质瘤C6Bu-1细胞中观察到凋亡细胞的一系列特征性形态学变化,如细胞萎缩、染色质凝聚、核固缩,但作者认为,所引发的细胞凋亡不是通过Bc-l2、Bc-lxL和Bax的旁路途径,而是通过别的途径。Jin等在考察G-Rh2对SK-HEP-1细胞的作用时,发现细胞周期蛋白A-Cdk2的活动急剧上调,这些上调效应被Cdk2的一种显性负效等位基因的复合表达所阻断,从而促进细胞发生凋亡。有人认为,G-Rh2是

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通过产生活性氧(ROS)来诱导细胞凋亡的。

G-Rh2主要通过降低细胞中PKC的水平和介导Caspase、Bc-l2等信号旁路途径来达到抗肿瘤的作用,但是这种调节作用往往不是单纯通过某一个途径来发挥的,而是几个途径相互影响共同调节,但具体机理尚不太清楚,有待于进一步研究证实。

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2 影响细胞端粒酶的活性

端粒酶(telomerase)是一种RNA反转录酶,它能以自身RNA为模板,反转录合成端粒的重要序列。端粒酶是肿瘤的特异标志物,端粒酶在正常体细胞为阴性,而绝大多数肿瘤细胞呈阳性表达。检测端粒酶有助于肿瘤的诊断,有助于对恶性肿瘤的恶性程度和预后进行判断,也可作为衡量各种抗肿瘤治疗效果的评价指标[9]。Zeng等[10]在G-Rh2对SMMC-7721肝癌细胞系分化的体外诱导试验中发现,G-Rh2能够通过扭转端粒酶对转录酶mRNA的转录水平而促使细胞向正常情况分化,并且有效