微囊藻毒素LR对碱基切除修复基因和凋亡相关基因(4)

微囊藻毒素LR对碱基切除修复基因和凋亡相关基因mRNA表达的影响

和染毒时间对ＸＲＣＣｌ基因ｍＲＮＡ的表达没有交互作用（乃０．０５）。７２ｈ时，３０斗ｇ，ｒＩｌｌ染毒组ＸＲＣＣｌ基因ｍＲＮＡ的表达量低于其他各组，差异有统计学意义（Ｐ＜０．０５），见表６。

衰５

ＭＣＬＲ染毒后大鼠肝细胞ＪＷＡ基因ｍＲＮＡ的表达情况（ｉ虹，ｎ＝３）

注：与３０蚓ＩＩｌｌ染毒组比较，ｇｔＰ＜Ｏ．０５

表６

ＭＣＬＲ染毒后大鼠肝细胞姗ｃＣＪ基因

ｍＲＮＡ的表达情况（互盐，ｎ＝３）

注：与３０峭／Ｉｌｌｌ染霉组比较，８Ｐ＜Ｏ．０５

６．不同染毒剂量和不同染毒时间ＰＡＲＰＩ基因ｍＲＮＡ表达水平的变化：不同ＭＣＬＲ染毒剂量和不

同染毒时间对ＰＡＲＰｌ基因ｍＲＮＡ的表达均有影

响，且ＭＣＬＲ染毒剂量和染毒时间对ＰＡＲＰｌ基因ｍＲＮＡ的表达有交互作用（尸锄．０５）。４８ｈ时，３０ｗｇ／ｍｌ染毒组ＰＡＲＰｌ基因ｍＲＮＡ的表达量低于对照组和１ｗｓ／ｍｌ染毒组，差异有统计学意义（Ｐ＜０．０５）；染毒７２ｈ时，３０ｖ．ｒＣｍｉ染毒组ＰＡ尺川基因ｍＲＮＡ的表达量低于其他各组，差异有统计学意义（Ｐ＜０．０５）。

４８、７２

ｈ染毒组ＰＡＲＰｌ基因ｍＲＮＡ的表达量随着

染毒剂量的增高有降低趋势（表７）。

讨

论

碱基切除修复与凋亡这两个通路是相互联系的，两条通路精确的调节决定着细胞自身修复与自我保护机制，当这两条通路无法协调时，受损的细胞无法正常修复或正常凋亡，便易发生肿瘤。这两条通路间的联系枢纽便为ｐ５３基因，细胞损伤的程度、损伤的类型、损伤的持续时间不同，均影响着ｐ５３基因对下游这两条通路的选择与启动。ＤＮＡ损万方数据

伤包括ＤＮＡ单链断裂、双链断裂、碱基改变、胞嘧啶的水解脱嘌呤、水解脱氨基、５．甲基胞嘧啶、ＤＮＡ共价加合物的形成、碱基或ＤＮＡ磷酸二酯键骨架的氧化损伤等多种形式。大部分损伤均通过碱基剪切修复（ＢＥＲ）、核苷酸剪切修复（ＮＥＲ）、错配修复

（ｍｉｓｍａｔｃｈｒｅｐａｉｒ）等ＤＮＡ修复途径进行修复，不能

完全修复则启动凋亡系统。研究表明。ＭＣＬＲ是通过增加肝细胞内ＲＯＳ而引起细胞ＤＮＡ损伤，ＤＮＡ

产生的８．羟基鸟嘌呤是其主要损伤形式，而ＢＥＲ

是这种损伤形式的主要修复途径，因此，我们选择碱基修复通路上的关键基因和凋亡相关基因进行研究。

表７

ＭＣＬＲ染毒后大鼠肝细胞ＰＡＲＰｌ基因ｍＲＮＡ的表达情况（ｉ拯，ｎ＝３）

注：与３０肛ｓ／ｍｌ染霉组比较，８Ｐ＜Ｏ．０５

１．ＭＣＬＲ对大鼠肝细胞ＢＲＬ－３Ａ的毒性作用：

本次ＭＴｒ研究结果显示，不同剂量ＭＣＬＲ和不同染毒时间对大鼠肝细胞存活率均有影响，且两因素间存在交互作用。各剂量组细胞存活率随着ＭＣＬＲ浓度的增高而降低，呈剂量一效应关系；同时，也随着染毒时间的延长而降低，呈时间一效应关系，这表明ＭＣＬＲ对ＢＲＬ－３Ａ细胞具有毒性作用。农清清等Ｉ习研究发现，ｌ斗∥ｍｌ以上剂量的ＭＣＬＲ能抑制ＨＴｌ７细胞的增殖与活性，这些结果均与本次实验研究结

果相符。

２．ＭＣＬＲ对大鼠肝细胞的碱基修复基因和凋亡相关基因ｍＲＮＡ表达的影响：当细胞ＤＮＡ受损时，通过对细胞周期抑制，使细胞停滞在Ｇ。期或Ｇ２期，给细胞进行修复损伤的时间。在这个过程中ｐ５３基

因起重要作用，ｐ５３基因是一种重要的抑癌基因１６１，

被认为是基因毒性的传感器，是连接ＤＮＡ损伤、损伤修复和凋亡的中心枢纽。本次研究结果显示，只

在染毒２４ｈ时，在ＭＣＬＲ高浓度水平上表现ｐ５３基

因的表达上调，而其他染毒浓度与和其他时间点与对照组比较均无明显差异。这短暂的上调可能是细胞对ＤＮＡ损伤的一种反应，通过上调ｐ５３基因表达，使细胞停滞在Ｇ。期，促进ＤＮＡ修复，从而减少