根据GenBank中报道的猫白介素-18基因(IL-18)序列,对用ConA刺激的实验猫外周血单核细胞(PBMCf)进行了RT-PCR扩增;将扩增得到的PCR产物纯化后克隆入pMD18-T中得到重组质粒pTIL-18,进行核苷酸序列测定,并与不同物种的IL-18基因进行了序列比较。结果该基因全长579bp,编码1

202农 业 生 物 技 术 学 报 2007 年

­phe­leu。本实验在分析猫 存在 IL­1 类似的特征性结构。

分子时， 也没有发

导 NK细胞产生 IFN­酌(Okamura 。鉴于

现其含有信号肽序列和 N­ 联糖基化位点，但同样

目前的研究表明， IL­18 是一种多效细胞因子， 可能在大型猫科动物疫病 IL­18 的多种生物学功能，

的防治中发挥重要的作用，因此对全长的 基 因进行了融合表达，由于 IL­18 分子含有多段疏水 它主要具有以下生物学功能：第一， IL­18可以刺激

T 细胞进行分化增殖，能诱导 CTL 细胞和 PHA 激

活的 T 细胞的增殖（Reddy， 2004 Okamura 1995）

。第二， 可诱导 B 细胞的分化增殖。Airoldi (2000)检测了 IL­18 对 B 细胞的刺激能力，

发现 IL­18 对活化的 B 细胞具有激活能力，对静止的 B

细胞不产生刺激效应。第三， IL­18 可以通过 IL­2R 的某些成分来激活 NK细胞的增殖 (Okamura 

1998)，

同时诱导 NK细胞的细胞毒活性。第四， 可诱 参 考 文 献 

AiroldiI,GriG,MarshallJD,CorcioneA,FacchettiP, GuglielminoR,TrinchieriGandPistoiaV.Expressionand functionofIL­12andIL­18receptorsonhumantonsillarB cells(J).Journalof 

2000,165:6880~6888 

BietF,LochtCandKremerL.Immunoregulatoryfunctionsof interleukin18anditsroleindefenseagainstbacterial pathogens(J). 2002,80(3): 

147~162 

DinarelloCA.Interleukin­18(J). 

1999,19(1):121~132 

GardellaS,AndreiC,CostiglioloS,PoggiA,ZocchiMRand RubartelliA.Interleukin­18synthesisandsecretionby dendritic

cells

are

modulated

by

interaction

with 

antigen­specificTcells(J). 1999,66(2):237~241 

Lebel­BinayS,BergerA,ZinzindohoueF,CugnencP,Thiounn N,FridmanWHandPagesF.Interleukin­18:Biological propertiesandclinicalimplications(J). 

2000,11(1):15~26 

OhkusuK,YoshimotoT,TakedaK,OguraT,KashiwamuraSI, IwakuraY,AkiraS,OkamuraHandNakanishiK. Potentialityofinterleukin­18asausefulreagentfortreatment andpreventionof 

majorinfection. 

性 琢螺旋结构， 导致表达量不高。将表达的蛋白进 行纯化和复性后，我们初步进行了体外淋巴细胞转 化试验 （MTT 法）， 结果复性的蛋白没有检测到生物 学活性 （另文发表）

， 这与 Ushio 研究结果

不同。 本实验表明， 用原核表达系统来制备具有生物 学活性的 IL­18 蛋白是非常困难的，下一步我们将 利用毕赤酵母或杆状病毒表达系统来表达猫 IL­18， 探讨重组猫 IL­18 的生物学活性，为其在猫科动物 病毒性感染的防治研究提供了基本资料。

OkamuraH,TsutsuiH,KomastuT,YutsudoM,HakuraA, 

TakimitoT,TorigoeK,OkuraT,NukadaY,HattoriK,Akita K,NambaM,TanabeF,KonishiK,FukudaSandKurimoto M.CloningofanewcytokinethatinducesIFN­gproduction byTcells(J). 

1995,378:88~91 

OkamuraH,TsutsuiH,KashiwamuraS,YoshimotoTand NakanishiK.Interleukin­18:Anovelcytokinethataugments bothinnateandacquiredimmunity

1998 70:281~312 

OkamuraH,KashiwamuraS,TsutsuiH,YoshimotoTand NakanishiK.Regulationofinterferon­gammaproductionby IL­12andIL­18(J). 1998,10 (3):259~264 

ReddyP.Interleukin­18:Recentadvances(J). 

2004,11(6):405~441 

UshioS,NambaM,OkuraT,HattoriK,NukadaY,AkitaK, TanabeF,KonishiK,MicallefM,FujiiM,TorigoeK, TanimotoT,FukudaS,IkedaM,OkamuraHandKurimoto M.CloningofthecDNAforhumanIFN­γ ­inducingfactor, expressionin 

andstudiesonthebiologic 

activitiesoftheprotein(J). (9):4274~4279 

ZhangXY(张艳仙).Progressoninterleukin­18(J). 

国外医学

·生理、 病理科学与临床分册).1999,19 (6):532~535(inChinese)