A.1目的：

描述测定羟脯氨酸含量的方法。A.2原理：

羟脯氨酸作为氨基酸的组成部分而存在于胶原中，但并不存在于一般的蛋白质中，羟脯氨酸氧化脱羧生成吡咯与对二甲氨基苯甲酸显色生成红色，生成的颜色深浅与羟脯氨酸的含量成正比。A.3设备要求：A.3.1A.3.2A.3.3A.3.4

分析天平

紫外可见分光光度计电热恒温干燥箱不锈钢镊

A.4化学试剂A.4.1A.4.2A.4.3A.4.4A.4.5A.4.6A.4.7A.4.8A.4.9A.4.10A.4.11A.4.12

盐酸氯胺T羟脯氨酸乙二醇甲醚枸橼酸钠醋酸醋酸钠氢氧化钠过氯酸

对二甲氨基苯甲醛酚酞指示剂无水乙醇

A.5试剂准备

-枸橼酸钠缓冲液pH6.0；A.5.1醋酸醋酸-pH6.0；

50g枸橼酸钠，12ml冰醋酸，120g醋酸钠，34g氢氧化钠，加水至1升，并用醋酸调节至pH6.0，冷藏。

A.5.2氯胺T溶液

1.4g氯胺T溶于20ml水中，加入30ml乙二醇甲醚和50ml醋酸-枸橼酸钠缓冲液混合，由于氯胺T不稳定，必须在使用前配制。A.5.3过氯酸溶液

70%的过氯酸27ml，加水至100ml。A.5.4对二甲氨基苯甲醛溶液

对二甲氨基苯甲醛溶液20g，用乙二醇甲醚溶解并加至100ml，冷藏保存。有结晶析出时，使用前加温溶解。

A.5.56mol的盐酸溶液