堆肥复合功能菌剂的优化组合研究

第８期胡春明等：堆肥复合功能菌剂的优化组合研究

１０４ｌ

１．２．２分析指标及方法

解磷菌在解磷过程中不可忽视的重要部分；同时，纤Ｉ．２．２．１

解无机磷菌株和纤维素降解菌的活化

维素降解菌释放纤维素酶来降解纤维素，并可为解将４株解磷菌和２株纤维素降解菌分别用相应磷菌发挥其解磷能力提供良好的环境．一般情况的无机磷固体培养基和纤维素种子固体培养基进行下，纤维素降解菌在发酵试验的中后期可发挥更大斜面划线，在５５℃的培养箱里进行菌种活化．的作用¨｝悖１．在解磷菌活性逐渐减退，数量大幅减１．２．２．２种子液制备

少的情况下，纤维素降解菌可在细胞中贮藏磷酸盐，将活化好的斜面菌株，接种于对应的种子培养有效固定微生物量磷，从而保证在发酵的整个过程基中，５５℃摇床培养，摇床转数为１２０ｒ／ｍｉｎ，振荡

中可利用磷素的前后均衡，这是采用以上２种菌筛７２

ｈ，经镜检菌种量约达到１０３ＣＦＵ／ｍＬ，备用．

选复合菌剂试验的主要原因，也便于其在以后的堆１．２．２．３发酵试验

肥过程中发挥更大的作用．将各种子液按照均匀试验设计表的配方以浓度２．２均匀设计表的软件回归分析

比接种至解磷菌发酵培养基中，以不接菌为对照，每由于试验所选菌株的耐受温度在５５℃，因此进次３个重复，在５５℃，１２０ｒ／ｍｉｎ下，摇床培养９ｄ，对行了在５５℃发酵条件下对解磷能力等相关影响因解磷总量进行分析．

素的均匀设计研究．

解磷总量［按Ｐ（ＴＰ）计］的测定：向上述剩余的将４株耐高温解磷菌和２株耐高温纤维素降解发酵液中加入２

ｍＬ

Ｈ：０２，振荡后，１６０℃灭菌１２０

菌按比例混合，配成复合菌剂，再按１０ｍＬ／Ｌ接种量ｒａｉｎ，以充分破坏菌体，释放出微生物量磷，５

０００

接种至发酵培养基中，对解磷总量进行测定，结果如ｒ／ｍｉｎ离心取上清液，采用钒钼黄比色法¨列测定解磷表２所示．

总量．

裹２均匀设计试验方案及测试结果

１．２．２．４纤维素降解发酵试验

Ｔａｂｌｅ２

Ｕｎｉｆｏｒｍｄｅｓｉｇｎｔａｂｌｅａｎｄｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌｒｅｓｕｌｔｓ

将优化菌剂进行纤维素液体发酵培养，对纤维素酶活进行测定，以检验其纤维素降解能力．将优化的复合菌剂接种于纤维素液体发酵培养基。

５５℃，１２０

ｒ／ｍｉｎ下摇床培养，发酵培养基经５

０００

ｒ／ｍｉｎ离心１０ｒａｉｎ，收集上清液测ＣＭＣａｓｅ酶活¨４。７１，同时作葡萄糖标准曲线．１．３主要试验仪器

７２１型分光光度计［ＵＶ一２１０２Ｃ型，尤尼柯（上海）仪器有限公司］；振荡式摇床（ＴＣＱＹ型，太仓市试验设备厂）；恒温水浴锅（ＨＨ一６型，江苏省金坛市荣华仪器制造有限公司）；恒温培养箱（３０３ＰＡ一４型，上海树立仪器仪表有限公司）；台式高速冷冻离心机（ＴＧＬ一１６Ａ型，长沙平凡仪器仪表有限公司）；立式压力蒸汽灭菌锅（ＬＳ—Ｂ３５Ｌ型，江阴滨江医疗设备厂）；光学显微镜（Ｎｉｋｏｎ５０ｉ，日本Ｎｉｋｏｎ公司）和ｐＨ酸度计（ＰＨＳ一３Ｃ型，上海天达仪器有限公司）等．

２结果与分析

２．Ｉ目的菌株的选择

选取４株解磷菌和２株纤维素降解菌进行复合菌剂的筛选．解磷菌在发酵试验前期可很好地发挥解磷能力，能够将难溶性的磷矿粉分解成可溶性磷以及转化成自身的微生物量磷，其中微生物量磷是