胸腺肽β4在小鼠卯母细胞和早期胚胎中的表达与(4)

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生物化学与生物物理进展Prog.Biochem.Biophys.2009;36(9)

ABCDE

染色质位置重叠的表达(图3-C)．无论在哪一种核质构型的GV期卵母细胞当中，在核仁区域内都没有明显的Tb4蛋白分布．

GV期卵母细胞经过体外培养2.5h后多数发生生发泡破裂(germinalvesiclebreakdown,GVBD)，在该类卵母细胞当中，核膜轮廓呈现弥散状变化，Tb4蛋白同样以较高强度分布于正在发生破裂的核膜区域(图3-D)．经体外培养3h后，在生发泡完全破裂的卵母细胞中，染色质高度凝集，逐渐转变为染色体状态，此时Tb4蛋白在原有核膜区域出现环状区域的阴性表达区域，而在染色体间的表达强度略高于胞质平均水平(图3-E)．体外培养5h时，该分子在胞质中还表现为弥散状分布，而在体外培养7h的卵母细胞中，该分子则表现为均匀分布(图3-F,G)．个别GV期卵母细胞，经过体外培养不能发生GVBD，该类细胞生发泡膨大，Tb4蛋白在细胞核内表达极弱，而在核膜位置仍然呈现高水平的凝集状态(图3-G)．

Fig.2RelativeexpressionofTb4peptide(2s)in

oocytesfromovarianfolliclesofdifferentmaturelevels

A～E:ThesameasFigure1.Thegroupswithsignificantdifference(P<0.05)werenotedwithdifferentlowercaseletters.

仍有明显的强烈聚集；在完全环绕核仁染色质核构型(surroundednucleolus，SN)中，该分子在核膜处呈现点状的表达，在核仁组织中心区域存在与环状

50滋m

Fig.3

Tb4peptideexpressioninG吁stageoocytes(withdifferentchromatinconformation)

andoocytesofdifferentmaturelevels

Numbersnote:1,Chromatinstainedwithhoechst33258,blue;2,TheexpressionofTb4,FITC-antibodytagged,green;3,Theexpressionofmicrofilaments,rhodamine-phalloidintagged,red;4,Mergedfigures.Lettersnote:A,Nonsurroundednucleolus(NSN)chromatinconfiguration;B,Partlysurroundednucleolus(PSN)chromatinconfiguration;C,Surroundednucleolus(SN)chromatinconfiguration;D,Earlygerminalvesiclebreakdown(GVBD)stage,IVC2.5h;E,IVC3h;F,IVC5h;G,IVC7h;H,GVBDblockedafterIVC5h

．

GV期卵母细胞经体外培养8h后，多数处于M玉期，皮质区呈现微丝的高度极性凝集，Tb4蛋白在中期染色质分布处有着类似纺锤体形态的分布，而在胞质皮质下缘也有较高强度的表达(图4-A)．当M玉期染色体完成旋转之后，该分子在染色质与卵母细胞膜之间的表达水平略高于其他皮质部分(图4-B)．GV期卵母细胞经体外培养9h第一极体排放时，微丝与Tb4蛋白均在即将形成极