胸腺肽β4在小鼠卯母细胞和早期胚胎中的表达与

生物化学与生物物理进展

ProgressinBiochemistryandBiophysics2009,36(9):1193~1201

胸腺肽鄄茁4在小鼠卵母细胞和早期胚胎中的

表达与分布规律

张

岩

李树峰

杨彩荣

郑可佳

李

宁

严云勤*

(东北农业大学动物细胞与发育生物学教研室，哈尔滨150030)

摘要胸腺肽-茁4(thymosin-茁4，Tb4)是一种重要的G-actin遮蔽因子(G-actinsequesteringfactor)，在细胞微丝活动中有着调节

G-actin活性的作用．以往报道证实了Tb4在细胞中具有广泛的生理作用，但其在哺乳动物卵母细胞成熟和早期胚胎发育等方面的作用，迄今还没有系统的研究报道．以昆明白小鼠卵巢、卵母细胞和早期胚胎作为实验材料，以免疫(荧光)组织化学和RT-PCR技术为主要研究方法，对Tb4的表达与分布进行了研究．结果显示，Tb4在相关发育过程中，存在差异性的表达和定位变化．结果表明，在小鼠卵母细胞成熟和早期胚胎的发育过程，Tb4能够通过表达与分布的变化对细胞微丝活动和细胞增殖活动进行调控，对小鼠卵母细胞成熟、早期胚胎发育以及胚胎着床过程有重要的作用．关键词

胸腺肽-茁4，小鼠，卵母细胞，胚胎，微丝，免疫荧光组织化学，激光共聚焦扫描显微镜

Q2

DOI:10.3724/SP.J.1206.2009.00043

学科分类号

胸腺肽最初是从动物胸腺组分中分离获得的一类生物活性物质，在机体免疫和神经内分泌等方面有着重要的调节功能．1972年，Goldstein等[1,2]从小牛胸腺组分吁中分离提纯了一种分子质量5ku、由43个氨基酸残基组成、亲水性较强的胸腺肽家族新成员———胸腺肽-茁4(thymosin-茁4，Tb4)．Tb4普遍存在于脊椎动物的多种组织器官[3,4]和部分无脊椎动物机体当中[5]，且具有高度的保守性[6]．Tb4具有十分广泛的生物学功能，近期研究表明，其与免疫调节[7]、神经发育[8]、伤口愈合与炎症反应[9,10]、血管发生[11]、细胞凋亡[12]以及肿瘤发生与迁移[13]等生理和病理活动均有关系．

细胞各种微丝活动的动态调整均伴随G-actin活性的变化，Tb4能够与G-actin以1∶1的比例结合，从而抑制其聚合成微丝[14]．细胞中接近一半的G-actin是通过结合各种遮蔽因子(G-actinsequesteringfactor)而达到活性抑制与储备的目的[15]，而Tb4正是G-actin活性遮蔽作用的主要执行者[16]．近期研究还证实，Tb4分子具有形成配体参与内分泌与细胞核内信号转导的作用[17,18]，此外，该分子本身还是谷氨酰胺转移酶的作用底物，能够参与凝血过程中纤连蛋白与胶原蛋白的合成与组装[19]．

迄今针对Tb4多样性功能性的研究已经取得了许多突破，但其在哺乳动物卵母细胞成熟与早期胚胎发育方面的作用还没有系统的研究报道．因此，本实验尝试以小鼠卵母细胞和早期胚胎为主要实验材料，初步揭示Tb4在哺乳动物卵母细胞成熟和早期胚胎发育中的表达与分布规律．

1

1援1

材料与方法

实验动物

实验动物为昆明白品系小鼠，雌鼠5～8周龄，雄性适龄，由东北农业大学组织胚胎研究室提供．小鼠饲养于室温22℃，人工光控条件，保证自由取食、饮水．所用雄鼠均单笼饲养，雌性小鼠集中饲养．

1援2主要试剂和仪器

山羊抗thymosin-茁4单克隆抗体与FITC标记兔抗山羊二抗(SantaCruz公司)，生物素标记兔抗山羊二抗与HRP标记链酶卵白素(北京中杉金桥公

*通讯联系人.

Tel:0451-55190846,E-mail:yanyunqin@收稿日期：2009-01-06，接受日期：2009-03-25