高纯度燕麦β-葡聚糖测定方法研究(2)
发布时间:2021-06-11
发布时间:2021-06-11
把含有样品的试管放入40℃水中,保持5分钟。加地衣多糖酶试剂(0.2ml),振荡。
放入40℃水浴中分解2小时,并不时振荡。加醋酸钠缓冲溶液(50ml,200mM,Ph4.0),用振荡器振荡样品。
将试样降到室温。准确用移液枪在三个测定试管中添加0.1ml的已经过地衣多糖酶酶解的高纯度燕麦β-葡聚糖样品。
加β-葡萄糖苷酶试剂0.1ml到三个测定试管中的两个,第三个作为空白,添加0.1ml50mM醋酸钠缓冲液。加GOPOD试剂3.0ml到三个试管中,在37℃水浴中分解20分钟。取出样品,并用分光光度计测定(510nm)。
2.2标准曲线
以标准葡萄糖配成浓度分别为0.0,6.4,9.6,12.8,16.0,19.2μg/ml的标准样品,以分光光度计在510nm下测定吸光度。