抗体的制备与纯化

抗体的制备与纯化

抗体的制备与纯化

第一节

常规抗血清的制备方法

一、动物的免疫

二、抗血清的采集

抗体的制备与纯化

动物的免疫1、免疫动物的选择

2、抗原接种

3、佐剂的应用

抗体的制备与纯化

免疫动物的选择种属与品系 经济性 “R”型与“H”型 经验性适配

抗体的制备与纯化

抗原接种 剂量： 注射途径： 间隔与免疫时间： 接种次数：

抗体的制备与纯化

佐剂的概念与种类概念：与抗原同时或先于抗原进入

机体，以提高抗原的免疫原性的物质。

种类：非免疫原性物质 免疫原性物质

抗体的制备与纯化

佐剂的作用机理延长抗原的作用时间增强吞噬作用

刺激抗原提呈促进细胞因子分泌

诱导淋巴细胞分裂、增殖影响T细胞“极化”

抗体的制备与纯化

抗血清的采集1、采集方法

2、血清的分离与灭活

抗体的制备与纯化

采集方法一次性采集

多次性采集

抗体的制备与纯化

抗血清的分离与灭活血清析出的温度

血清的灭活

抗体的制备与纯化

第二节

单克隆抗体的制备方法

一、单克隆抗体与杂交瘤技术

二、单克隆抗体的制备过程

三、单克隆抗体的特性

抗体的制备与纯化

单克隆抗体与杂交瘤技术1、单克隆抗体

2、杂交瘤技术

抗体的制备与纯化

抗原克隆A 表位A 表位B 克隆B 表位C

多 克 隆 抗 体

克隆C

单克隆抗体

抗体的制备与纯化

单克隆抗体

由一个识别单一抗原决定 簇(表位)的B细胞克隆所产 生的同源抗体。

抗体的制备与纯化

杂交瘤技术

通过融合经免疫的小鼠脾 细胞和建系小鼠骨髓瘤细胞， 以获得同时具有抗体分泌功能 和保持细胞永生性特征的杂交 瘤细胞克隆。是获取单克隆抗 体的主要技术途径。

抗体的制备与纯化

单克隆抗体制备过程1、致敏淋巴细胞的准备 2、骨髓瘤细胞的准备

3、细胞融合4、选择性培养 5、抗体分泌细胞的筛选 6、克隆化过程 7、单克隆抗体的制取