ATP生物发光原理及应用研究

ATP生物发光是一种快速的微生物检测方法,具有灵敏、快速、简便、稳定等优点,本文就其原理、特点及在食品卫生、医药中的应用进行了综述。

综述

21 0 0年 4月第 7卷第 1 2期

A P生物发光原理及应用研究 T侯英，雪琼，兴华吴王

(. 1山西大学生物技术研究所，山西太原

0 0 0;. 3 0 12解放军第三。九医院结核病研究所，北京0 00 ) 3 0 1

10 9; 0 0 1

3山西大学生命科学与技术学院， .山西太原

【摘要】 T生物发光是一种快速的微生物检测方法， AP具有灵敏、快速、简便、稳定等优点，本文就其原理、特点及在食品卫生、医药中的应用进行了综述。

【词】 T;用；关键 A P应生物发光原理【中图分类号】 3 9 R 1【文献标识码】A

[章编号】 17 - 2 02 1 )4 C - 1- 3文 6 3 7 1 (0 0 0 ()0 2 0

Re e r h o i l m i e c n h o y a d a l i fA TP s a c n b o u n s e tt e r n pp yng oHOU n t U Xu qo g,WANG Xig u￣ Yig, e in 2 nha

(.il ia T c n l yR sac ntui f hn i nvr t, a u n 0 0 0, hn; .h u ec l i R ssh 1 o gcl eh o g eerhIs tt no ax iesy T i a 3 0 1 C ia 2T eT b ruo s eec B o o i o S U i y s

Istt no 0 layHopt f hn, e ig 10 9, hn; .h ntui f i c n eadT c n l f ntui f 9 Mit si o ia B in 0 0 1 C ia 3T eIs tt no f S i c n eh o g o i o 3 ir l a C j i o Le e o y S ax nvr t, aya 0 0 0, hn ) h n i ie i T iu U sy n 3 0 1 C ia [ b ta t safs dtcigme o fmirogns A P bo miecn eh stea v t e es vt, ih A sr c]A t eet t d o cora i a n h m, T ih nse c a h d a a so sn i i hg— i n g f i t ys e d o v ne c n tbly a d S n h ril u p e,c n e in ea d sa ii n O o .T e at e s mmaie t p n ils h a trsis a d a piain t

od t c rz si r cp e,c a ceit p lc t o fo s i r c n o

h ge eadme i n . y n dc e i n i[ ywo d】 T; p l ai; i u iecn er Ke r s A P A pi t n Bo m n se th oy c o l t

生物发光 (ilmiecn e bo n sec )在希腊语中表示活着的意 u

反应的结果是把化学能转化为光能。 18 9 3年 Moe等提出 yr细胞内源性的 A P含量可以反应活细胞的数量和活性。其 T化学反应如下：ATP D-L cf rn O『 x l cf rn AMP+ P++ i h + u iei+一 y u ie i+ P i Oz L g t

思，拉丁语中表示发光、在发亮。目前生物发光，用最广最应主要的是荧光素一荧光素酶反应发出的荧光，荧光素酶存在

于萤火虫、母和一些细菌中，是生物体内产生的一种生水它物反应蛋白质l l J。三磷酸腺苷 (d n s et p op a .称 AT )高能磷 a eoi ih sh t简 n r e P是

当细胞受损或死亡时。 A P值迅速下降或消失，于其 T基这一原理 .检测细胞内的 A P含量， T即可反应其细胞的存活状况。T A P浓度与活细胞数密切相关 . T A P生物发光检测步骤包括：取样、品 A P的提取、加荧光素一光素酶、样 T添荧测

酸化合物。AT P由一分子腺嘌呤、一分子核糖和三个相连的磷酸基团构成的核苷酸，结构式见图 1其。0 H。~ 圳 0

定生物发光值、算出 A P的浓度和活菌数量。检测时先将计 TA P与提取剂充分混合，细胞壁和细胞膜裂解， T使释放 A P T,再加入荧光素一荧光素酶， T A P在荧光素和荧光素酶的作用下， 使其释放磷酸基团同时发出荧光，生物荧光仪检测相对荧光用强度 ( l iel h nt, L,此测出 A P的含量，而反 r a v gt i R U)由 et i u s T进

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映活细胞数。这项技术高度敏感，只需 5 0个细胞就能测出 AT P的量，而且， A P含量为 15 1 1 l当 T 0~ 2mo L时， 0/活细胞的对数值与 A P发光值的对数值之间存在良好的线性关系[ 1 T 3。 - 5图 1三磷酸腺苷的结构式

2A TP生物发光特点2 1ATP生物发光优点 .

Fg 1 A e o ietp o p ae i. d n sn ih s h t r

灵敏、速、便、定是 A P生物发光的主要优势所快简稳 T A P存在于所有的有机体中，易被储存和利用，活 T极是在，同时可以把 A P数量化，荧光强度 ( L把光定量， T用 R U)广泛应用于食品工业、医药、生物学等领域。22ATP生物发光法的不足 .

细胞新陈代谢能量的源泉，化学反应中 .在主要是通过释放磷酸基团从而达到释放能量的目的。1A TP生物发光工作原理

荧光强度 ( L和菌落形成单位 ( F之间没有直接关 R U) C U)系.也无法对细菌的种属进行鉴定。有的学者设想通过测定 A WC U的大小来预测样品中所含菌种类别， T F如果 A PC U T/F较小，示样品中可能主要含有形态较小的孢子或 G一提细菌， 如果 A PC U较大 .提示样品中主要含有形态较大的细 T/F菌或酵母菌[ 6 1。

16 9 3年 Mc k y最先用荧光素酶一 E om Ar P检测法，化学其【金项目】国家重大传染病防治科技重大专项基金资助项目 (0 8 X基 20 Z10 3 0 1。 0 0 - 0 )

[者简介】英 (98 )女，放军第三。九医院结核病研究所，西作侯 17一，解山大学在读硕士研究生。‘讯作者通

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