盐生杜氏藻软胶囊中β, β-胡萝卜素几何异构体组成的测定

286 2008, Vol. 29, No. 06

２２．１

结果与分析

食品科学

１２．００

ｙ＝０．３１４９ｘ

１０．００峰面积（ＬＳ单位）

Ｒ２　＝０．９６７８

８．００６．００４．００２．０００．００

０．００

※分析检测

几何异构体在Ｃ３０－ＨＰＬＣ－ＰＤＡ－ＥＬＳＤ上的分离与鉴定

０．３５０．３００．２５０．２００．１５０．１００．０５０．００－０．０５

０．００

ⅠⅡ

吸光度

Ⅲ

１０．００２０．００浓度（ｍｇ／ｍｌ）

３０．００４０．００

４．００８．００１２．００１６．００２０．００２４．００保留时间（ｍｉｎ）

图４　　　全反式异构体量与其ＥＬＳＤ峰面积响应值的相关性Fig.4 Correlation of response from ELSD and amount of all

E-isomer

７００ＰＤＡ峰面积（ｋＶ ｓ）

６００５００４００３００２００１００００．００

２．００

４．００

６．００

８．００

ｙ＝７５．３１１ｘＲ２＝０．９１８

Ｉ．全反式异构体；ＩＩ．１３－顺式异构体；ＩＩＩ　．９－顺式异构体。图２　　β，β－胡萝卜素全反式异构体经碘诱导后C30-HPLC-PDA色谱图Fig.2 C30-HPLC-PDA chromatogram of iodine-induced all E-β，

β－carotene

１４００

Ⅰ

响应值（ＬＳ单位）

１０００

６００

Ⅱ

２００

Ⅲ

ＥＬＳＤ峰面积（ＭＬＳ单位 ｓ）

图５　　１３－顺式异构体ＰＤＡ与ＥＬＳＤ峰面积的相关

Fig.5 Correlation of PDA response and ELSD response of

13Z-isomer

１０００ＰＤＡ峰面积（ｋＶ ｓ）

８００６００４００２００００．００

５．００１０．００

ＥＬＳＤ峰面积（ＭＬＳ单位 ｓ）

－２００

０．００

５．００

１０．００

１５．００

２０．００

２５．００

保留时间（ｍｉｎ）

Ⅰ．全反式异构体；Ⅱ．１３－顺式异构体；Ⅲ．９－顺式异构体。图３　　　β，β－胡萝卜素全反式异构体经碘诱导后C30-HPLC-ELSD色谱图Fig.3 C30-HPLC-ELSD chromatogram of iodine-induced all

E-β，

β－carotene

ｙ＝７８．７５９ｘＲ２＝０．９５６

图２、３分别为全反式β，β－胡萝卜素异构体经碘诱导后Ｃ３０－ＨＰＬＣ－ＰＤＡ与Ｃ３０－ＨＰＬＣ－ＥＬＳＤ的色谱图。根据各组分的色谱行为和光谱特征结合参考文献所介绍的方法为其定性。２．２关性

据李京等的报道，在被测得类胡萝卜素物质浓度较低时，ＥＬＳＤ检测器的信号与其量间存在线性关

［５］

β，β－胡萝卜素几何异构体量与其ＥＬＳＤ峰面积的相

图６　　９－顺式异构体ＰＤＡ与ＥＬＳＤ峰面积的相关

Fig.6 Correlation of PDA response and ELSD response of

9Z-isomer

６００ＰＤＡ峰面积（ｋＶ ｓ）

５００４００３００２００１００００．００

２．００

４．００

６．００

ＥＬＳＤ峰面积（ＭＬＳ单位 ｓ）

图７　全反式异构体ＰＤＡ与ＥＬＳＤ峰面积的相关

Fig.7 Correlation of PDA response and ELSD response of all

E-isomer

ｙ＝９４．５７７ｘＲ２＝０．９０９２

系。如图４所示，当样品中全反式β，β－胡萝卜素浓度在５．６～３２．５ｍｇ／ｍｌ范围内时，其量与ＥＬＳＤ上的组分峰面积呈现良好的线性关系。２．３

几何异构ＰＤＡ和ＥＬＳＤ峰面积的相关

如图５～７所示，不同浓度的１３－顺式异构体、９－

顺式异构体和全反式异构体样品在ＰＤＡ和ＥＬＳＤ上的峰面积。之间显示出正线性关系。２．４

顺式异构体吸光系数的估算

以全反式异构体吸光系数为基准，根据式（１），可