盐生杜氏藻软胶囊中β, β-胡萝卜素几何异构体组成的测定

284 2008, Vol. 29, No. 06

食品科学※分析检测

盐生杜氏藻软胶囊中β　，β－胡萝卜素

几何异构体组成的测定

惠伯棣１，张　艳２，叶　珊１

（１．北京联合大学应用文理学院，北京　　　　　　１０００８３；２．首都师范大学生命科学学院，北京　　　　　　１０００３７）

摘　　　要：采用Ｃ３０－ＨＰＬＣ－ＰＤＡ－ＥＬＳＤ系统，参照已公布的全反式异构体的吸光系数（Ａ１％　β，β－胡萝卜１ｃ＝２５００），根据ｍ素顺式异相体电子吸收光谱峰面积与ＥＬＳＤ质量峰面积之比，估算出９－和１３－顺式异构体的吸光系数分别为２０１８和１９９０。根据其色谱峰面积，可以准确测量出盐生杜氏藻软胶囊中β，β－胡萝卜素几何异构体的组成。关键词：β，β－胡萝卜素；几何异构体组成；吸光系数

Ｇｅｏｍｅｔｒｉｃａｌ　Ｉｓｏｍｅｒ　Ｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎ　Ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ　ｏｆ　β，β－ｃａｒｏｔｅｎｅ　ｆｒｏｍ　Ｄｕｎａｌｉｅｌｌａ　ｓａｌｉｎａ

ＨＵＩ　Ｂｏ－ｄｉ１，ＺＨＡＮＧ　Ｙａｎ２，ＹＥ　Ｓｈａｎ１

（１．Ｃｏｌｌｅｇｅ　ｏｆ　Ａｐｐｌｉｅｄ　Ａｒｔｓ　ａｎｄ　Ｓｃｉｅｎｃｅ，　Ｂｅｉｊｉｎｇ　Ｕｎｉｏｎ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，　Ｂｅｉｊｉｎｇ　　　　　　１０００８３，　Ｃｈｉｎａ；

２．Ｃｏｌｌｅｇｅ　ｏｆ　Ｌｉｆｅ　Ｓｃｉｅｎｃｅ，　Ｃａｐｉｔａｌ　Ｎｏｒｍａｌ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，　Ｂｅｉｊｉｎｇ　　　　　　１０００３７，　Ｃｈｉｎａ）

１％　　

Ａｂｓｔｒａｃｔ：　Ｉｎ　ｔｈｉｓ　ｓｔｕｄｙ，　ｒｅｆｅｒｒｉｎｇ　ｔｏ　ｐｕｂｌｉｓｈｅｄ　ａｂｓｏｒｐｔｉｏｎ　ｃｏｅｆｆｉｃｉｅｎｔ　（Ａ１ｃｍ＝２５００　ａｔ　４５０　ｎｍ）　ｏｆ　ａｌｌ　Ｅ－ｉｓｏｍｅｒ，　ｔｈｅ　ａｂｓｏｒｐｔｉｏｎ

ｃｏｅｆｆｉｃｉｅｎｔｓ　ｏｆ　　９－，　ａｎｄ　１３－ｉｓｏｍｅｒｓ　ａｒｅ　ｄｅｄｕｃｅｄ　ａｓ　２０１８　ａｎｄ　１９９０，　ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ，　ａｃｃｏｒｄｉｎｇ　ｔｏ　ｔｈｅ　ｒａｔｉｏ　ｏｆ　ｔｈｅｉｒ　ｓｐｅｃｔｒｏｓｃｏｐｉｃ　ａｎｄｍａｓｓ　ｒｅｓｐｏｎｓｅｓ　（ｅｇ．　ｐｅａｋ　ａｒｅａｓ　）　ｏｎ　Ｃ３０－ＨＰＬＣ－ＰＤＡ－ＥＬＳＤ．　Ａｃｃｏｒｄｉｎｇ　ｔｏ　ｔｈｅｉｒ　ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｉｃ　ｐｅａｋ　ａｒｅａｓ，　ｔｈｅ　ｇｅｏｍｅｔｒｉｃａｌ　ｉｓｏｍｅｒｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎ　ｏｆ　β，β－ｃａｒｏｔｅｎｅ　ｆｒｏｍ　Ｄｕｎａｌｉｅｌｌａ　ｓａｌｉｎａ　ｃａｎ　ｂｅ　ａｃｔｕａｌｌｙ　ａｓｓｅｓｓｅｄ．Ｋｅｙ　ｗｏｒｄｓ：β，β－ｃａｒｏｔｅｎｅ；ｇｅｏｍｅｔｒｉｃａｌ　ｉｓｏｍｅｒ；Ｃ３０　ｃｏｌｕｍｎ

中图分类号：ＴＳ２０１．２４　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　文献标识码：Ａ　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　文章编号：１００２－６６３０（２００８）０６－０２８４－０４β，β－胡萝卜素（β，β－ｃａｒｏｔｅｎｅ）是一种类胡萝卜素（ｃａｒｏｔｅｎｏｉｄ）。其习惯命名为β－胡萝卜素（β－ｃａｒｏｔｅｎｅ），分子式为Ｃ４０Ｈ５６。β，β－胡萝卜素分子由中央多聚烯链和两端的六元环末端基团组成，为双环结构，整个分子呈几何中心对称。由于中央共轭多烯链的存在使整个分子具有高度的不饱和性，可形成多种几何异构体。虽然在自然界中它经常以全反式（ａｌｌ　Ｅ－ｉｓｏｍｅｒ）的形式存在，但也常见其１３－和９－顺式异构体（Ｚ－ｉｓｏｍｅｒ，图１）的存在。

随着生命科学的发展，有许多证据证明β，β－胡萝卜素与人类的健康有着密切的关系。早在半个世纪前，人类就知道类胡萝卜素中的β，β－胡萝卜素可在哺乳动物的小肠中水解生成ＶＡ，进而参与视觉生理代谢。因此，它被称为ＶＡ原，是重要的营养物质。β，β－胡萝卜素类是良好的自由基猝灭剂，具有良好的抗氧化作用。它可有效地阻断细胞内的链式自由基反应，因而被认为是治疗和预防由此引起的许多顽疾的理想药物。经过上世纪９０年代的研究后，９－顺式异构体独特的保健功能已渐被人知，成为人们研究的重点［１］。β，β－胡萝

收稿日期：２００７－０６－２６

基金项目：北京市教育委员会科技发展计划面上项目（２００４１１４１７００３）

卜素已被广泛地应用于功能性食品和食品添加剂中，制

成了多种产品，如软胶囊等。

杜氏藻（Ｄｕｎａｌｉｅｌｌａ　ｓａｌｉｎａ）属于绿藻纲，团藻目，杜氏藻属，为单细胞绿藻。杜氏藻体内含有丰富的类胡萝卜素，主要为β，β－胡萝卜素。其中的β，β－胡萝卜素包括多种几何异构体，有大量顺式异构体存在。鉴于上述顺式异构体的特殊功能，作为天然β，β－胡萝卜素资源的杜氏藻倍受关注。显然，测定杜氏藻产品中β，β－胡萝卜素几何异构体的组成无论是对产品的质量控制还是对其生物学功能的研究均有重要意义。

在Ｃ３０－ＨＰＬＣ上，β，β－胡萝卜素的几何异构体可以获得良好的分离［２－３］。由于参比样品的匮乏，β，β－胡萝卜素顺式异构体的定量需基于其电子吸收光谱范围内的吸光系数。在本研究中使用了蒸发光散射检测器（ＥＬＳＤ）。在ＥＬＳＤ上收集番茄红素全反式异构体信号的条件已由惠伯棣等建立完成［４］。在本项研究中将这一条件应用于β，β－胡萝卜素的信号收集中。在实验中，使用Ｃ３０－ＨＰＬＣ－ＰＤＡ－ＥＬＳＤ串联系统，同步收集每个β，β－