盐生杜氏藻软胶囊中β, β-胡萝卜素几何异构体组(4)

发布时间：2021-06-08

盐生杜氏藻软胶囊中β, β-胡萝卜素几何异构体组成的测定

※分析检测

估算出顺式异构体的吸光系数（见表１）。

表１　　　β，β－胡萝卜素顺式异构体吸光系数的估算

食品科学

2008, Vol. 29, No. 06287

提的。本研究的结果表明：各β，β－胡萝卜素顺式异构体的吸光系数是不同的。根据各组分色谱的峰面积，经过吸光系数的换算，所得结果见图１０（ｂ）。显然，图１０（ｂ）所示结果更真实地反映了盐生杜氏藻软胶囊内容物中β，β－胡萝卜素几何异构体组成。

Table 1 Estimation results of absorptivity of　β，β-carotene E-isomer

异构体种类

ＫＺ＊吸光系数（Ａ１ｃ＊＊）ｍ

１％

全反式异构体９，９＇－顺式异构体１３，１３＇－顺式异构体

９４．５７７２５００

７８．７５９２０１８

７５．３１１１９９０

注：＊：见式（１）；＊＊：光程为１ｃｍ时浓度为１％（Ｗ／Ｖ）的溶液吸光系数。

３．５０００２．５０００吸光度

１．５００００．５０００－０．５０００

０．００

Ⅰ

２．５几何异构化对分子电子吸收光谱特征的影响

Ⅲ

当β，β－胡萝卜素全反式异构体发生异构化时，其光谱特征亦发生变化。所有顺式异构体与全反式异构体相比，在３４２ｎｍ处会出现一特征性吸收峰，亦称“顺式峰”。同时，当全反式异构体发生顺式构型变化时，其电子吸收光谱主吸收段发生明显“紫移”，λｍａｘ紫移可达９ｎｍ（图８）。从图８可以看出：顺式异构化位置越靠近分子中部，电子吸收光谱“紫移”越明显。

１．１０００

１３－顺式异构体

０．９００００．７０００吸光度

０．５００００．３００００．１０００－０．１０００

３００

３５０

４００４５０

波长（ｎｍ）

５００

５５０

Ⅱ

５．００１０．００１５．００２０．００２５．００

保留时间（ｍｉｎ）

Ｉ．全反式异构体；ＩＩ．１３－顺式异构体；ＩＩＩ．９－顺式异构体。图９　　盐生杜氏藻软胶囊内容物的C30-HPLC色谱图

Fig.9 C30-HPLC-PDA chromatogram of Dunaliella salina soft-gel

capsule containing５２．４０％

４４．０７％

３９．５２％

４５．９２％

图８　　　β，β－胡萝卜素几何异构体的电子吸收光谱图

Fig.8 Electronic absorption spectra ofβ，β－carotene geometrical

isomers

８．０８％

Ⅰ

ａⅡ

Ⅲ

１０．０１％

ⅠⅡ

ｂ

Ⅲ

ａ．色谱峰面积结果；ｂ．经过吸光系数换算的结果。Ⅰ．全反式异构体；Ⅱ．

实际上，β，β－胡萝卜素全反式异构体的顺式异构化除了导致光谱精细特征发生变化外，其光吸收强度也有所改变。与全反式异构体相比，顺式异构体在λｍａｘ处的吸光能力下降，同时，在３４２ｎｍ处的吸光能力上升，形成顺式特征峰。顺式异构位置越靠近分子中心，二者的变化值越大。这一消长规律在客观上反映了β，β－胡萝卜素全反式异构体分子顺式异构化所导致的在λｍａｘ处的吸光系数下降与顺式特征峰强度增加之间的关系［６］。２．６

盐生杜氏藻软胶囊内容物中β，β－胡萝卜素几何异构体组成

图９为盐生杜氏藻软胶囊内容物的Ｃ３０－ＨＰＬＣ色谱图。根据其色谱行为和光谱特征可对其中各β，β－胡萝卜素几何异构体组分进行定性。

由于β，β－胡萝卜素顺式异构体参比样品的缺乏，在一般的检测中只能根据其色谱的峰面积进行测定，其结果见图１０（ａ）。这样做是以各组分的吸光系数相同为前

１３－顺式异构体；Ⅲ．９－顺式异构体。

图１０　　盐生杜氏藻软胶囊内容物中β，β－胡萝卜素几何异构体的组成Fig.10 Geometrical isomer composition ofβ，β－carotene from

Dunaliella salina soft-gel capsule containing

参考文献：

［１］［２］［３］［４］［５］［６］

惠伯棣．　类胡萝卜素化学及生物化学［Ｍ］．　北京：　中国轻工业出版社，２００５．

惠伯棣，　张茜，　文镜．　反相Ｃ３０柱在ＨＰＬＣ分析类胡萝卜素中的应用［Ｊ］．　食品科学，　２００５，　２６（１）：　２６４－２６９．

惠伯棣，　李京，　裴凌鹏，　等．　Ｃ３０－ＨＰＬＣ－ＰＤＡ分离与鉴定β，β－胡萝卜素几何异构体［Ｊ］．　食品科学，　２００６，　２（１０）：　２５２－２５５．

惠伯棣，　李京，　郑康成．　蒸发光散射检测器在番茄红素反相ＨＰＬＣ定量分析中的应用［Ｊ］．　食品科学，　２００６，　２７２：　２２６－２３０．