烟草黑胫病菌0号小种不同条件下培养特性的研究(3)

时间:2025-03-13

研究了烟草黑胫病菌0号小种的若干培养性状,为进一步展开与之相关的研究和综合防治提供试验依据。本实验用培养基、光照、菌龄、诱导剂和诱导时间等不同因素来研究烟草黑胫病菌0号小种的生长速度、产孢量和游动孢子释放量等培养特性。结果表明:将0.1%KNO3和1%葡萄糖混合液加入在燕麦培养基上避光培养21d的培养皿中,经26℃恒温培养72h后,突降12℃培养0.5h,最易产生孢子囊和释放游动孢子。

(1)实验方案 用0.1%KNO3、0.1%KNO3和1%葡萄糖混合液分别浸泡不同菌龄的菌丝,以无菌水作为对照(CK),设置三个重复,镜检孢子囊和游动孢子的数量。

(2)实验方法 同1.2.2,并用血球计数板法计算游动孢子的浓度。

2 结果

2.1 菌落及菌丝形态特征

选择燕麦培养基(OA)上的供试菌株进行观察,菌丝生长旺盛,菌落质地均匀。在显微镜下观察(图1)显示,菌丝粗细不均,无隔膜,有分枝,局部有菌丝膨大体,其上有若干条放射状菌丝。孢子囊卵圆形、近球形或不规则形,通常1个、少数2个呈半球形的乳突;部分孢子囊上有丝状附属物,在条件适合时可释放游动孢子。游动孢子椭圆形或圆形,可在水中游动,遇寄主时萌发产生芽管侵入;当条件不适宜时,孢子囊可直接长出芽管侵入寄主;厚垣孢子是烟草黑胫病赖以度过不良环境的主要形态,本实验并没观察到。

2.2 菌丝生长与培养基和光照的关系

由表1可以看出,黑胫病0号小种菌丝在5种不同培养基上28℃恒温培养生长趋势基本一致,黑暗条件下以OA培养基上的病菌平均生长速度最快,生长的菌丝最丰厚、浓密,其次是烟叶汁培养基,CMA培养基、TJA培养基和PDA培养基差别不大。光照条件下各培养基中菌丝的平均生长速度与避光条件下相似,然而,在同一种培养基上黑暗条件下培养的菌丝平均生长速度比光照条件下的稍快。在本研究提供的5种培养基中,黑胫病0号小种最适于在OA培养基上生长,光照不利于菌丝的生长。

表1 避光条件下不同培养基上菌丝生长速率

菌种 培养基类型

OA培养基

烟叶汁培养基

CMA培养基

TJA培养基

PDA培养基 测定数量 5 5 5 5 5 1d 10.6 9.3 7.1 8.4 9.2 平均菌落直径/mm 2d 38.3 28.5 20.8 21.6 19.7 3d 69.5 56.9 39.5 37.2 36.5 4d 82.4 71.6 50.2 49.8 48.3 5d 88.0 83.1 65.3 62.7 60.2 菌丝平均生长速率(mm·d-1) ≥17.6 16.62 13.06 12.54 12.04 烟草黑胫病0号小种

2.3 各培养基上不同光照处理病菌的产孢量

供试菌株在5种不同的培养基上均能产生孢子囊,在同一种培养基上不同光照处理的产孢量存在差异,光照下相对产孢量少,孢子囊的大小也有所不同。相同光照处理下,OA培养基上产生的孢子囊数量最多,其次是烟叶汁培养基和CMA培养基,TJA培养基和PDA培养基上产孢数量相对较少。黑暗条件下培养的

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