湖北仙桃中学2015届高三理综试题(14)

（2）实验室可采用______________________________法进行菌种纯化，在对该菌种进行培养时，与常规培养基相比还需要额外在培养基中添加______________________________。

（3）为了保持所获得菌种纯净，需要进行菌种的保藏。若采用临时保藏，将菌种接种在____________________上，放入4℃冰箱中可保藏3~6个月；若要长期保存，可将菌液与灭菌的____________________混匀，放在-20℃的冰箱中保存一年。

（4）市场上购买的真空包装酸菜，在没有发生漏气状态下发生了“胀袋”现象，A同学怀疑是杂菌污染导致的，B同学怀疑是乳酸菌大量繁殖导致的，说出你支持谁的观点并说出理由。支持__________，理由是__________________________________________________。

40.［生物—选修3:现代生物科技专题](15分)

为增加油菜种子的含油量，研究人员尝试将酶D基因与位于叶绿体膜上的转运肽基因相连，导人油菜细胞并获得了转基因油菜品种。

(1)研究人员依据基因的已知序列设计引物，采用____________法从陆地棉基因文库中获取酶D基因.从拟南芥基因文库中获取转运肽基因.所含三种限制酶(Cla I、Sac I、Xba I)的切点如下图所示。则用______________和_____________酶处理两个基因后，可得到____________ (填图中字母)端相连的融合基因。

(2)将上述融合基因插入右上图所示质粒的T-DNA中.构建____________并导入农杆菌中.将获得的农杆菌接种在含____________的固体平板上培养得到含融合基因的单菌落，再利用培养基震荡培养，可以得到用于转化的浸染液.

(3)剪取油菜的叶片放入染液中一段时间，此过程的目的是________________________.进一步筛选后获得转获因油菜细胞.该细胞通过____________技术.可培育成转基因油菜植株。

(4)提取上述转基因油菜的mRNA.在逆转录酶的作用下获得cDNA.再依据______的DNA片段设计引物进行扩增.对扩增结果进行检侧.可判断融合是否完成______。

(5)用_______________法可检测转基因油菜植株中的融合基因是否成功表达.