组培技术培训:建组培室岂止是盖房那么简单--亚龙组培
发布时间:2024-11-12
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从技术角度分享组培室建设的细节。
组培室建设可不是想建房子那样简单,在前面一期文章里谈过类似的问题,但是仅仅从几个比较浅显的方面出发。下面就从整个组培技术方面谈一谈。
组织培养苗生产车间是组培育苗的核心。植物组织培养育苗,包括培养基的制备、消毒灭菌、接种、增殖培养和生根诱导等若干步骤。按各步骤的要求,组培苗各生产车间可按流水作业排列设计,可分为更衣间、药品间、洗涤间、培养基消毒制作间、培养基础备间、缓冲间、紫外消毒间、接种间、大培养间和小培养间等。组培苗的规模要求。随着计划生产规模的不同,各作业间的大小可根据需要变动。如果为了节省用地,也可以改成楼层设计,但是,必须增加电梯吊装设备,并考虑各作业间之间流水作业的便捷。此外,除以上所提作业间外,还应考虑在附近设置办公室、卫生间和杂品贮藏库等。有条件的还应考虑冷藏库,用以暂时存放原种材料和待出库移栽的组培苗,以及某些需要低温处理的材料如百合等。
第一,更衣间更衣间是工作人员进入组培苗生产车间的第一道门户。为防止外界尘土和污染物的带入,凡进入组培苗生产车间的工作人员必须在此换鞋和更换洁净的工作服。更衣间内应设置衣柜(架)和鞋柜及洗手池。日常应保持室内整洁,并经常进行工作服和拖鞋的清洗。室内除正常安装一般照明灯外,还可以安装紫外消毒灯,以便定期进行室内消毒。
第二,洗涤间洗涤间主要用于清洗各种培养器皿和用具等,必须保证有通畅洁净的水源、洗涤池和排水系统。洗涤间内配备必须的洗涤用具(各种型号适用的洗瓶刷、试管刷等)、洗涤剂和洗涤架或洗涤筐等,有条件的可配备洗瓶机和消毒柜等。为便于器皿的运输,还应配备一定数量的医用手术药械移动小推车(以下简称小推车,)。在洗涤间内还应配备蒸馏水和纯净水制备装备,以供培养基母液制备和制作培养基用水。制备培养基母液最好用纯净的蒸馏水,制作生产性培养基时可用一般纯净水,所谓纯净水的最低水质要求是水的电阻值应大于200欧姆。
第三,药品间药品间内主要存放组培生产常用的化学试剂,如各种无机盐、有机物、生长调节剂、消毒剂及各种生化试剂等。室内要求保持干燥、整洁,各种药品排放整齐、有序,避免阳光直射。室内需配置药品柜、干燥器、冰箱等,因为有些药品,尤其是激素类和一些有机、生化试剂及其配制的培养基母液必须
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低温保存。此外,室内还必须配置水泥台,摆放万分之一的分析天平,以便称取激素、微量元素等药品。特别需要提出的是对一些有毒药品,如升汞等,必须严格保管,建立药品使用登记责任卡,以免发生意外事故。
第四,培养基制作、消毒间该作业间的面积一般需要稍大些,室内可按培养基的制备、分装、消毒的流水作业程序安排布置。室内要配置实验台和必要的仪器设备,如1/10至1/100 感量的天平、冰箱(保存母液等)、pH计、搅拌器、移液管、量筒、定量分液器、大容量容器、小推车和高压消毒锅等等。为便于培养基消毒的操作,应根据消毒锅大小和类型(立式或卧式)制作合适的耐高温的铁筐或塑料筐以便放置培养瓶。由于高压消毒锅的用电量极大,在建筑设计时应考虑用电负荷设置专线。此外,还需注意安装室内的排气装置,以便排除由高压锅排放出来的蒸汽。
第五,培养基贮备,间经过消毒后的培养基及无菌纸和用具等存放于此室备用。室内可配备一定数量的货架(柜)。存放的培养基必须严格标明培养基代号及消毒日期,并且排放整齐、有序。室内宜保持较低的温度和避免阳光直射,并应安装紫外消毒灯,以便经常对室内环境进行消毒杀菌。
第六,紫外消毒间,从培养间取来准备进行继代培养的材料,或从外单位引入的试管种苗在进入接种室前,为减少瓶外的污染源带入接种间,一般需要先在此室内用紫外线消毒立方米的空间安装一支分钟。如果是塑料袋培养的袋装苗,则应先用消毒剂擦洗塑料袋。消毒间内除需配置一些培养架外,必须安装紫外消毒灯,一般可按每波长外,必要时也可以熏蒸消毒杀菌接种间接种间是进行外植体接种、试管苗切割增殖和试管内诱导生根等无菌操作的场所,对环境的无菌条件要求较高。
第七,缓冲间,为防止外界气流的直接侵入,在接种间的入口处必须加设缓冲间,缓冲间内应设衣柜和鞋柜,供接种工作人员更换工作服和鞋、帽、口罩等用。缓冲间内应随时保持整洁,并定期用紫外灯或熏蒸消毒。还应配置洗手池,供接种工作人员工作前洗手用。 接种间的地面、墙面和吊顶必须光滑洁净,便于清洗且不沾尘土。有窗户时,窗户的密闭性必须良好,避免外界尘土侵入。
第八,接种间内根据需要应配置一定数量的超净工作台。实践经验表明,为便于接种工人的操作和提高接种的工作效率。布置超净工作台时必须注意防止各
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超净工作台的气流的相互干扰,并应考虑室内物品运送和各项操作的方便,以便提高工作效率。超净工作台上应配备接种用的工具(解剖刀、镊子等)和消毒用的酒精瓶及酒精灯(或高温焚化炉)等。超净台下应放置污物桶,以便存放接种过程中的丢弃物,污物桶必须每天清洗更换。接种间内除需配置一定数量的紫外消毒灯外,还应配备一定的防火设备,以防万一。
第九,培养间。培养间是培养组培苗的关键场所之一,要求有一定的控温和控光设备,以保证试管苗生长所需的温度和光照(光周期)条件。以前许多人认为在恒温下组培苗生长最好,但是实际上对许多作物来说并非如此,组培苗在这种昼夜有温差的条件下要比在恒温条件下生长健壮得多。当然,适宜的培养温度因作物种类和培养阶段不同而异,必须根据需要加以调控。譬如,一些南方的花卉(绿巨人、花叶芋、竹芋、巴西木等)需要较高的培养温度,而有些有夏休眠特性的花卉植物(如仙客来、翡翠珠等)常常需要稍低的温度,光照强度在段是采用空调器,在较小面积的培养间内可以用窗式或柜式的冷暖型空调,如果培养间面积较大,最好采用中央空调,以保证培养间内各部位温度相对均衡。在培养间的多个代表部位应放置温度表或自计温度仪。培养间内的光照,通常是采用培养架上的日光灯照明,并用定时控制器来控制光周期。对一般植物而言,光照时间每天2000-3000勒左右已经足够。安装日光灯时最好选用电子整流器,发热量小。如果采用普通铁芯式的整流器,为避硬铁丝网间隔,每层配置整流器发热影响培养间内的温度控制,最好将它安装在培养间外面的通风处。培养架是培养间内主要设备,是摆放组培材料的场所。通常可用铁或铝合金制作,根据培养间房屋的高度,一般设5-7层,层间距为50-60厘米左右,每层宽2-3支40瓦的日光灯管。为便于运送和安放培养瓶等作业,培养间内还必须准备一定数量的小推车和折叠梯子。
由于许多植物在组培诱根阶段常需一定时间的暗培养,因此,在设计培养间时也可以考虑安排一个暗培养间。为了节约起见,也可以准备一些用红、黑双层布缝制的遮光被,需要时将培养瓶包裹起来进行必要的暗培养。但这种方法的缺点是较难单独调控温度。因为有些植物在诱导生根的前几天常需要较高的温度。
培养间还必须根据空间大小,配置一定数量的紫外消毒灯,以便定期对培养间进行消毒杀菌。培养间内由于灯管数量较多,用电量很大,设计时应考虑用电
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负荷,设置专线和配电设备。为尽可能地减少培养间的电耗,降低生产成本,在设计培养间时,可考虑加大窗户增加采光,缩小房间的深度,以充分利用自然光(散射光),而以日光灯作为补充光源。要想提高生产效率,还有很多细节需要把控。
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