10.10 X TE, 500ml 配制如下: 将 100mM Tris-Hcl （PH=8.0 ）6.057g 与 10mM EDTA （ PH=8.0 ） 1.8612g 溶于 400ddH2O 中，调 PH=8.0 ，定容到 500ml 。

11. 1 X TE Buffer

组成浓度： 10mM Tris-HCl 1mM EDTA PH=8.0

配制量： 500ml

配制方法：量取下列溶液于 500ml 烧杯中

1M Tris-HCl Buffer PH=8.0 5ml

0.5M EDTA PH=8.0 1ml

向烧杯中加入约 400mldd H2O 均匀混合；将溶液定容到 500ml 后，高温高压灭菌；室温保存 .

12.聚丙烯酰胺凝胶电泳 PAGE

PAGE 操作流程及注意事项：

1 、涂胶

1 ）将有耳玻片（耳朝下）泡于反硅化剂中，新液 25 分钟，旧液 30 分钟 .

2）涂无耳正面玻片硅化剂 . 均匀点四滴，轻而匀的沿一个方向涂三次，静 10 分钟.

3）到时间取出 .打开通风橱风干 30 分钟.

2、封胶

1 ）将两玻片对贴于橡胶框中，放平，用力拧死，夹住橡胶管 .

2）溶废琼脂胶，分两次：第一次 50 秒，第二次 10-20 秒，防止沸出 .

3）用小细长枪头通透加胶枪头，便于加样通畅，少起气泡.

4）吸 2500-3000ul 液胶加速沿玻片边缘快速顺下滴，将两面玻片充分封死，防止漏胶 .以水平底线面水平高于底为佳，静止凝胶 15 分钟 .(有时可先在封口加一点TBE 以润滑玻片，利于胶流下)