微生物药物学(4)

8 放线菌分子（基因）水平的分类分析包括哪5方面的内容?

答：（1）DNA的G+C%分析；

（2）DNA-DNA杂交分析；

（3） DNA指纹技术分析；

（4） PCR基础上的DNA指纹技术；

（5） 16rRNA分类分析；

9 应用放线菌G+C%分类指标的原则是什么?

答： A： G+C%不同的两个菌株肯定不是同种；

B： G+C%相同的两个菌株不一定是同属或同种；

C： 同种内不同菌株间的G+C%的差值应在2.5-5%；

D：同属不同种间的G+C%的差值应在10%以内；

10 应用DNA-DNA杂交进行放线菌分类的原理是什么?

答：通过测定DNA核甘酸顺序互补程度来估计不同菌株间基因型之间的同源性，亲缘关系越近的两株间的杂交率越高，它是准确鉴定放线菌种、属关系的重要指标。

11 伯杰氏细菌鉴定手册中放线菌DNA-DNA杂交分类的原则是什么？

答：伯杰氏细菌鉴定手册提出：同源性≥60%同种；同源性60%~70%为同一种内不同亚种；同源性＜ 20%不是同属的种

12 什么是DNA限制性片段长度多态性（RFLP）?为什么可用于放线菌的分类研究?

答：将基因DNA用适当的限制性内切酶随机切割后，进行琼脂糖凝胶电泳，得到一系列长度不同的DNA片段的条带，这些条带可作为特定菌株的DNA指纹，亲缘关系越近的菌株间DNA指纹也越相似。

13 微生物数值分类的概念是什么?数值分类结果用什么来表示各菌株间的分类关系?

答：数值分类：又称统计分类，是在获取菌株大量表型特征的基础上，应用计算机算出它们的相似性，根据相似性进行分类鉴别的方法，它可用于种或属以上单元的分类。 微生物的数值分类结果用树形图谱来表示菌株间的分类关系.

14 对于一个未知的放线菌菌株, 进行分类鉴定的一般步骤是什么?

答：1 获得菌株的纯培养物；

2 测定菌株的表型特征；

3 测定菌株的化学分类特征；

4 16S rRNA 序列分析和进化树的构建；

5 将未知菌株与相似或相同模式菌株进行DNA分子杂交，分析其同源性, 进行最终确认。 15 1989年出版的《伯杰氏细菌鉴定手册》，将放线菌划分为哪9个大的类群?

答：1 放线菌群(Actinobacteria); 2 游动放线菌群(Actinoplanets); 3 马杜拉放线菌群(Maduromycetes); 4 小单孢菌(Micropolyspores);

5 多腔孢囊群(Multiocalarsporangia); 6 诺卡菌群(Nocardioforus);

7 类诺卡菌群(Nocardioforus); 8 链霉菌群(Streptomycetes);

9 高温单孢菌群(Thermomonosporus);

第四章 微生物药物的分离与纯化

1 微生物药物提取前的预实验内容及意义是什么？

答：1 预实验内容：菌体浸提物的活性；在不同pH下有机溶剂萃取；不

同吸附剂的吸附与洗脱；纸层析或纸电泳分析；不同pH下对温度

的稳定性；