低氧诱导因子在低氧中对人外周血内皮祖细胞分化的影响-http___www....

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实验研究

【文章编号】 l)3 92 61 0 0 2 5 ( . 4( 0) - . 8 0 X 9 0 4 53 - 7

低氧诱导因子在低氧中对人外周血内皮祖细胞分化的影响姜萌。王长谦。王彬尧。黄定九

(海第二医科大学附属仁济医院心内科，上上海市 2g 1 (￣ )

[关键词】病理学与病理生理学；低氧诱导因子 l;氧分压降低；内皮祖细胞；内皮细胞；细胞扩增 a [摘要】目的研究低氧诱导因子 l在体外氧化压降低环境中对人外周血内皮祖细胞向血管内皮细胞分化的 d影响。方法密度梯度离心法分离人外周血内皮祖细胞 .电穿孔技术转染低氧诱导因子 l质粒，算转染效率； d计 逆转录聚合酶链反应测定常氧和低氧环境中低氧诱导因子 l、B al及其血管内皮生长因子 m N R A在质粒转染前后表达变化。Wet l检测转染前后低氧诱导因子 l蛋白表达， sr b t e o n d流式细胞术测定细胞膜表面抗原决定簇、荧光报告蛋白空质粒或低氧诱导因子 l质粒转染组转后的组问差异， d一氧化氮酶法鉴定各组血管内皮生长因子依赖性一氧化氮的释放活性，镜下观察细胞形态及分化程度。结果质粒转染效率约 2%; 0转染 2 . 0h低氧诱导因子 l R am . N A在常氧中及低氧中均有表达 .表达程度与氧浓度无关( P>0 0 )低氧及转染低氧诱导因子 l基因诱导血管内 .5; d 皮生长因子表达上调 ( 0 O ) 1 P< .5;6亚基表达在各组中无明显差异 ( P>0 O )%低氧 3h氧诱导因子 l蛋白 .5。l低 d 开始表达， 6h时表达成倍增加，2h达高峰，4h 1 2表达回到基线水平。流式细胞仪检测发现，转染后常氧下孵育 3天， p G P组 c 3细胞占总细胞数 4 .%±43,氧诱导因子 l组占 5 .%±37 (转 EF Dl 02 .%低 d 38 .% P<0O )孵育 l天 .; 5 0后转 p G P组 c 3细胞占 5 .%±35 .氧诱导因子 l占 6 .%±66 ( EF Dl 18 .%低 d组 62 .% P<0 O )转染后低氧下孵育 .5。 3天， pG P组 C 3细胞占总细胞

数 4 .%±3 5,氧诱导因子 1组占 6 .%±5 0 ( 0 O )孵育 1转 EF D1 68 .%低 d o2 .% P< .5; O天， p G P组 C 3细胞占5 .%±3 5低氧诱导因子 l组占 7 .%±19 P<0 O )转 EF D1 90 .%, d 61 .%( .5。低氧较常氧易促氧化氮释放，染低氧诱导因子 l基因使一氧化氮释放增加，放含量与血管内皮生长因子刺激量成正比，转 d释随刺激时间延长而增加 ( P<0 0) .1。低氧环境加快内皮祖细胞向内皮细胞分化、增，氧诱导因子 l粒转染同扩低 d质一

样促进内皮祖细胞分化。结论低氧诱导因子 l质粒能有效地应用于转录水平进行基因干扰治疗， d并在低氧环境中增效.有助于促进内皮祖细胞向内皮细胞分化，为进一步诱导体内血管新生、治疗缺血性心脏病提供了更广阔的治疗选择。

[中图分类号】 R 6 33

[文献标识码】 A

Hy o i n u i l a t r 1 n g ltd m a En o heil Pr g n t l r m p xc I d c be F c o a Ge e Re ua e Hu n d t l o e i a or Ce l fo sPe i h r lBl o i y o i rp e a o d n H p x aⅡ G Meg n,WAN h n - a1 G C a gQi,WA G i- a,ad HU NG Dn -i J N Bn Y o n A igJu (Ⅻ古 咧 oⅢw f,砌 H st,S,g, e n o// a￣ h Sc dMe/￣ pa . a o da .20 0 .Ofa 00 1 f ) n

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