响应面法提取生物黄酮的相关资料

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响应面法优化西兰花总黄酮提取工艺的研究

周向军１，高义霞１，汪之波１，张继１ ２

（１．天水师范学院生命科学与化学学院。甘肃天水７４１００１；２．西北师范大学生命科学学院，甘肃兰州７３００７０）

摘要：利用响应面法优化西兰花总黄酮的提取工艺条件。在预试验的基础上，以乙醇为溶剂，提取西兰花总黄酮。选取提取温度、提取时间及液固比、乙醇浓度４个因素进行Ｂｏｘ—Ｂｅｎｈｎｋｅｎ中心组合设计，利用响应面分析法对提取工艺参数进行优化。结果表明，西兰花总黄酮的提取工艺为：乙醇浓度９０％，液固比３０：１，提取温度８５．２８。Ｃ，提取时间１．８２ｈ；预测值为０．８８７％，实际得率为０．８５３％，两者较接近，说明Ｂｏｘ—Ｂｅｈｎｋｅｎ设计结合响应面分析法可很好地对西兰花总黄酮提取工艺进行优化。

关键词：西兰花；总黄酮；响应面法；提取中图分类号：ｔ１２８４．３

文献标志码：Ａ

文章编号：１００５—８１４１（２０１０）０６—０４８８—０２

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西兰花（Ｂｒａｓｓｉｃａｏｌｅｒａｃｅａ脚．Ｉｔａｌｉｃａ）又叫绿菜花、青

花菜，十字花科芸苔属甘蓝变种１～２年生草本植物。

西兰花营养丰富，含蛋白质、糖、脂肪、维生素和胡萝卜

发利用提供理论参考。

１材料与方法

材料：西兰花购于甘肃省天水市兰天超市，低温烘干后粉碎，过８０目筛，备用。

主要试剂及仪器：乙醇、亚硝酸钠、硝酸铝、氢氧化钠等均为国产分析纯；芦丁标品为优级纯，购于南京替斯艾么中药研究所。电子天平（北京赛多利天平有限

素等，营养价值居同类蔬菜之首…１。西兰花具有防癌

抗癌的功效，尤其是在防止胃癌、乳腺癌方面效果更佳。除了抗癌作用外，西兰花还含有丰富的抗坏血酸和黄酮类物质，前者能增强肝脏解毒能力，提高机体免疫力；后者则不仅能减少心血管疾病的发生，而且对高血压、心脏病有调节和预防作用。黄酮类物质属于天

公司），砒卜５２ＡＡ旋转蒸发仪（上海亚荣生化仪器

厂），ＳＨｚ—Ｄ循环水式真空泵（河南开封宏兴科教仪器厂）。

然多酚类抗氧化剂，具有抗脂质过氧化和清除自由基

的作用［２］２。目前各种植物材料中黄酮类物质的提取工艺多采用正交设计法，但正交设计只能处理离散水平

标准曲线的制备：准确称取１２０。Ｃ干燥并恒重的

芦丁标准品２５ｒｎｇ，加入７５％的乙醇溶液８０ｒａｌ，加热溶

值，在实际应用中难免会有诸多局限性【３】３。响应面法

（Ｒｅｓｐｏｎｓｅ

ｓｕｒｆａｃｅａｎａｌｙｓｉｓ

ｍｅｔｈｏｄｏｌｏｇｙ，ＲＳＭ）的原理是用解，冷却后用７５％乙醇定容至ｌＯＯｍｌ，摇匀备用，配置成浓度为Ｏ．２５ｍｇ／ｍｌ的芦丁标准溶液。采用ＮＡＮ０２一

ＡＩ（Ｎ０３）３一ｌＮａＯＨ光度法制作标准曲线…。精密吸取Ｏ、２ｒｎｌ、３ｍｌ、４ｒｒｄ、５ｍｌ、６ｒｎｌ、７ｍｌ上述芦丁标准溶液，分别放置在２５ＩＴｌｌ的容量瓶中，加５％亚硝酸钠ｌｒｎｌ摇匀放

一个多元二次回归方程拟合多因子实验中多个因子与

响应值间的关系，估计回归方程的系数【４｜，通过对方程求极值的方法达到参数优化的目的。本研究在预实验基础之上采用Ｂｏｘ—Ｂｅｈｎｋｅｎ中心组合设计，响应面法优化了西兰花总黄酮的提取条件，为西兰花黄酮的开

收稿日期：２０１０一０４—１６；修订日期：２０ＬＯ一０５—２３

置６ｍｉｎ，加１０％的硝酸铝ｌｍｌ摇匀放置６ｍｉｎ，加４％的

氢氧化钠ｌＯｍｌ，用７５％的乙醇释至刻度，放置１５ｒａｉｎ后测吸光度。以吸光度为纵坐标、芦丁标准液浓度为横坐标，绘制标准曲线（图１）。

第一作者简介：周向军（１９８０一），男，甘肃省庆阳人．讲师，研究方

向生物化学与分子生物学。

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万方数据