研究进展

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２

ｖａｃＡ（ｖａｃｕｏｌａｔｉｎｇｃｙｔｏｔｏｘｉｎ）基因

ｖａｃＡ基因存在于所有的菌株中，但仅在５０％～６０％的菌株表达。表达的前体蛋白质为１３６～１４０ｋＤ。在ＶａｃＡ分泌过程中．ＶａｃＡ的信号肽协助前体蛋白穿过细菌内膜后留在内膜，ＶａｃＡ的Ｃ末端插入外膜协助前体蛋白通过后而留在外膜，分泌形成成熟的蛋白质分子量为８７ｋＤ或者９５

ｋＤ。

成熟的蛋白质可以被柔软的环区（ＬＯＯＰ）分为３７ｋＤ亚单位与５８ｋＤ亚单位。ＶａｃＡ是一种ＡＢ型毒素，降解产生两个分子量分别为３７ｋＤ和５８ｋＤ的亚单位，３７ｋＤ亚单位为ＶａｃＡ的Ａ亚单位．表达生物的毒性，５８ｋＤ亚单位则为Ｂ亚单位。主要是与靶细胞结合之亚单位。

Ａｔｈｅｒｔｏｎ等发现Ｈｐ的ｖａｅＡ为一种嵌合体．任意信号序列ｓｌａ、ｓｌｂ、ｓ２和中间区ｍｌ、ｍ２等位基因组合构成不同亚型。且ｖａｃＡ基因亚型的这种多样性与ｖａｃＡ基因功能有关，ｓｌａ引起胃窦黏膜炎性细胞浸润较ｓｌｂ或ｓ２更显著（Ｐｄ０．０５），ｍｌ较ｍ２更显著导致胃黏膜损伤

（Ｐｄ０．０５）［１“。我国西安地区胃癌以ｓｌａ型多见，ｍｌ、ｍ２型

之问差异无显著性，且发现ｓｌａ与胃癌、癌前疾病如异型增生、肠化生有一定关系［１¨。许多研究表明胃癌患者所感染的Ｈｐ大多含有ｖａｅＡ．ｖａｃＡ在体内外的实验中均可造成细胞的空泡样改变。推测其在胃癌的发生过程中可能起着重要

的作用。

ＶａｅＡ可能是通过作用于细胞膜上的Ｎａ＋一Ｋ＋一ＡＴＰ酶。影响离子间转运而引起细胞的空泡样变性。同时ＶａｅＡ不仅影响细胞增殖．还影响胃黏膜细胞中生长因子的调节机制．促进细胞生长因子及受体的过度表达。引起胃黏膜的增生和癌变。Ｇａｌｍｉｃｈｅ等发现：ＶａｃＡ直接损伤线粒体，导致细胞凋亡。并有可能在肿瘤发生早期阶段起作用［１扪。Ｙｕａｎ等研究表明．ＶａｃＡ能引起线粒体去极化。从而引起胃上皮细胞凋亡。影响或干扰细胞骨架各成分．引起肌动蛋白重排．致使微管结构发生紊乱［１”。幽门螺杆菌ｖａｃＡ基因表达谱的检测．揭示ｖａｅＡ＋通过影响细胞骨架相关蛋白基因的表达以及直接诱导肿瘤相关启动子基因的表达和抑制肿瘤抑制基因的表达来干扰细胞骨架的结构，从而导致肿瘤产生。同时也改变炎症和应激反应基因的表达。提示ｖａｃＡ是幽门螺杆菌致胃癌的重要基因Ｄ４］。ｖａｃＡ能抑制正常胃黏膜细胞肌动蛋白弹性纤维的形成和打乱微管的结构．显著减少粘着斑激酶（ｆｏｃａｌ

ａｄｈｅｓｉｏｎ

ｋｉｎａｓｅ，ＦＡＫ）的磷酸化与表达。

ＶａｃＡ破坏细胞骨架和干扰细胞信号转导通路。ＶａｅＡ引起细胞异常增殖可能与表皮生长因子（ｅｐｉｄｅｒｍａｌ

ｇｒｏｗｔｈｆａｃ－

ｔｏｒ．ＥＧＦ）有关，ＥＧＦ等生长因子促进上皮移行和细胞增殖对黏膜的恢复和胃腺体的重建至关重要。ＥＧＦ可以使ＥＧＦ受体的表达上调和磷酸化水平提高，并通过第二信使分子

ＩＰ３（ｉｎｏｓｉｔｏｌ

１．４。５－ｔｒｉｐｈｏｓｐｈａｔｅ）和ｒａｓ信号通路激活ｃ－ｆｏｓ

等原癌基因的转录。ＶａｃＡ可干扰ＥＧＦ信号传递过程。可抑制胃黏膜损伤的修复；ＶａｃＡ能抑制Ｈｅｌａ细胞前溶酶素Ｄ的成熟和释放，抑制ＥＧＦ灭活。而ＥＧＦ过度表达可以导致胃癌发生。最近发现ＶａｃＡ可刺激Ｐ１３Ｋ／Ａｋｔ信号传导通

万方数据

福建医科大学学报２００９年５月第４３卷第３期

路．促进糖原合酶激酶一３ｐ的磷酸化（ｇｌｙｃｏｇｅｎ

ｓｙｎｔｈａｓｅｋｉ—

ｎａｓｅ－３ｂｅｔａ。ＧＳＫ３ｂｅｔａ），从而抑制ＧＳＫ３的作用导致ｐｃａｔｅｎｉｎ积累，移位入细胞核从而影响基因的转录。从而提出Ｗｎｔ信号途径可能在ＶａｃＡ导致胃癌发生机制中发挥重

要作用‘“】。

３

ｉｃｅＡ（ｉｎｄｕｃｅｄ

ｂｙ

ｃｏｎｔａｃｔｗｉｔｈ

ｅｐｉｔｈｅｌｉｕｍ）基因

１９９８年Ｐｅｅｋ等根据Ｈｐ与胃上皮细胞黏附可能诱导毒力相关基因表达这一假说．通过比较黏附和未黏附于人胃

上皮细胞的Ｈｐ溃疡株和胃炎株的ｍＲＮＡ转录。发现了一

种新的Ｈｐ基因ｉｃｅＡ。ｉｅｅＡ基因分为ｉｃｅＡｌ和ｉｃｅＡ２，是与Ｈｐ胃黏膜细胞接触后诱导表达的基因ｕ“。ｉｃｅＡｌ与编码ＣＡＴＧ特异性限制性内切酶的基因ｎｌａｍ（Ｎｅｉｓｓｅｒｉａ

ｌａｃｔａｍｉ－

ｃａ）有高度同源性。在Ｈｐ与胃黏膜上皮细胞接触后ｉｃｅＡｌ表达上调。ｉｃｅＡｌ基因表达意味着上调Ｈｐ与上皮细胞的接触，与溃疡的发病密切相关。ｉｃｅＡ等位基因型是独立于ｃａｇＡ和ｖａｃＡ的一种毒力因子。Ｄｏｎａｈｕｅ等认为ｉｃｅＡｌ在大部分Ｈｐ菌株中并不是编码一个功能蛋白．而是在转录水平调节其下游基因ｈｐｙｌＭ的表达。通过ＤＮＡ甲基化水平的改变来调控相关毒力基因的表达。从而间接参与Ｈｐ的致病作用‘１７１。

有研究发现ｉｃｅＡｌ和ｉｅｅＡ２在临床分离株中的阳性表达率分别为６８％和８０％。大约４０％菌株呈双阳性表型。胃癌病例ｉｅｅＡｌ＋株显著高于胃炎病例（Ｐ＜ｏ．０１）而且ｉｃｅＡｌ与ｖａｅＡｓｌ总是同时表达［１８１。也有研究发现ｉｅｅＡｌ基因在胃腺癌中表达是胃炎的３．６倍，ｉｃｅＡｌ基因与ｖａｃＡｓｌ共同存在使发生胃腺癌的几率增加５．６倍Ｌ”］。研究发现在胃癌高发区的优势基因型组合为ｃａｇＡ＋，ｖａｅＡｓｌ／ｍｌｂ／ｍ２，ｉｃｅＡｌ／ｉｃｅＡ２ｃ”］。国内关于ｉｃｅＡ基因的研究也有一些报道［２１－２２］，认为ｉｃｅＡｌ亚型菌株与重度炎症特别是腺体萎缩和肠上皮化生关系密切。

４新近发现的毒力基因

生物芯片技术运用于Ｈｐ的研究，描绘出了不同Ｈｐ之间的基因多态性差异。提供了Ｈｐ与人类共同进化的证据。Ｈｐ诱导宿主细胞反应的基因表达谱，为Ｈｐ致病机制的研究提供了一个新的思路。与疾病相关基因及基因表达的检出差异．结合基因突变的方法．相关基因编码蛋白的功能被迸一步阐明。一系列新的Ｈｐ致病基因也逐渐被发掘出来．其中以编码外膜蛋白的ｏｉｐＡ基因、编码黏附素的ｓａｂＡ，ｂａｂＡ基因。编码限制性核酸内切酶的ｈｒｇＡ基因和另一Ｈｐ基因位点ＪＨＰ０９４７比较有代表性。它们与十二指肠溃疡和／或胃癌的相关性．显示它们有可能成为新的分子流行病学标志。

４．１

ｏｉｐＡ（ｏｕｔｅｒｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙｐｒｏｔｅｉｎ）基因ｏｉｐＡ基因编

码前炎症外膜蛋白，相对分子质量为３４ｋＤ。ｏｉｐＡ是一种较强的Ｈｐ致病基因。特别在Ｈｐ感染的炎症过程中起着重要的作用。ｏｉｐＡ的基因状态由信号肽编码区ＣＴ双核苷酸重复数目决定。基因的状态决定其是否表达蛋白。Ｚａｍｂｏｎ等