基因组DNA分离及纯化

后加入68.75 ml的异丙醇、41.25 ml的异丁醇，混合均匀，配制成Solution C溶液后使用。Solution C溶液请于4℃保存。

*4 首次使用前，请添加56 ml的100%乙醇，混合均匀。

表4-2 DNA提取试剂盒Column Set

试管名称 数 量

Filter Cup 50 支

Spin Column 50 支

Collection Tube（2 ml） 150 支

操作步骤：

1）① 取10～250 μl的全血（含抗凝剂）加入至Collection Tube中。

② 加入500 μl的Solution A。

③ 加入1 μl的RNase A1（使用时请混匀），激烈振荡15秒后，冰浴5分钟。

2）加入400 μl的Solution B，振荡混合。

3）加入1 ml的4℃预冷的Solution C溶液，充分混匀后，12,000 rpm离心3分钟。

注）Solution C溶液的制备方法请见第一页中的说明。

4）弃去上层有机相，再加入1 ml的4℃预冷的Solution C溶液，充分混匀后

12,000rpm离心3分钟。

5）弃去上层有机相，然后将水相溶液（无色下层）转移至置于Collection Tube

上的Filter Cup中，12,000 rpm离心1分钟。

6）弃Filter Cup，在滤液中加入400 μl的DB Buffer，混合均匀。

7）将试剂盒中的Spin Column安置于Collection Tube上。将上述操作6混合溶液

转移至Spin Column中，12,000 rpm离心1分钟，弃滤液。

8）将500 μl的Rinse A加入至Spin Column中，12,000 rpm离心1分钟，弃滤液。

9）将700 μl的Rinse B加入至Spin Column中，12,000 rpm离心1分钟，弃滤液。

10）重复操作步骤9。

11）将Spin Column安置于Collection Tube上，12,000 rpm离心1分钟。

12）将Spin Column安置于新的1.5 ml的离心管上，在Spin Column膜中央处加

入50～200 μl的灭菌蒸馏水或Elution Buffer，室温静置1分钟。

13）12, 000 rpm离心1分钟洗脱DNA。