食品化学实验方案(6)
发布时间:2021-06-08
发布时间:2021-06-08
(二)仪器:分光光度计722、小台秤、分析天平、烧杯(100mL)、研钵、容量瓶(100mL)、洗瓶、
漏斗、滤纸、具塞刻度试管(15mL)、恒温水浴、移液管(1mL, 2mL)。
(三)试剂
1.碘液:称取20.00g碘化钾,加50mL蒸馏水溶解,再用小台秤迅速称取碘2.0g,置烧杯中,将溶解的KI溶液倒入其中,用玻棒搅拌,直到碘完全溶解,若碘不能完全溶解时,可再加少许固体碘化钾即能溶解,碘液贮存在棕色小滴瓶中待用,用时稀释50倍。 2.乙醚。 3.10%乙醇。 三、操作步骤
(一)标准曲线的制作:用分析天平准确称取1.000g精制红薯淀粉,加入5.0mL蒸馏水制成匀浆,逐渐倒入90mL左右沸腾的蒸馏水中,边倒边搅拌,即得澄清透明的糊化淀粉溶液,置100mL容量瓶中,用少量蒸馏水冲洗烧杯。定容,此淀粉溶液浓度为10mg/mL(A液)。吸取A液2.0mL置100mL容量瓶,定容,此时淀粉浓度为200μg/mL(B液)。取具塞刻度试管8支,按下表加入淀粉及碘液,再加蒸馏水使每支试管溶液补足到10mL,摇匀,待蓝色溶液稳定10min后,用分光光度计于660nm波长处测其消光值。以消光值为纵坐标,已知淀粉溶液的浓度为横坐标绘制标准曲线。
试 管 编 号 碘液(mL) 蒸馏水(mL) 淀粉含量(μg/mL)
1 0.2 9.8 0
2 0.5 0.2 9.3 100
3 1.0 0.2 8.8 200
4 1.5 0.2 8.3 300
5 2.0 0.2 7.8 400
6 2.5 0.2 7.3 500
7 3.0 0.2 6.8 600
8 4.0 0.2 5.8 800
标准淀粉溶液[(200μg/mL)mL] 0
(二)样品处理:红薯洗净,去皮,用擦子擦成碎丝,迅速称取红薯碎丝300g,置研钵中磨成匀浆。将匀浆转移到漏斗中,用乙醚50mL分5次洗涤,再用10%乙醇洗涤3次,以除去样品中的色素,可溶性糖及其它非淀粉物质,然后将滤纸上的残留物转移到100mL烧杯中,用蒸馏水分次将滤纸上的残留物全部洗入烧杯,将烧杯置沸水浴中边搅拌边加热,直到淀粉全部糊化成澄清透明。将此糊化淀粉转移到100mL容量瓶中,定容,混匀(C液)。
(三)测定:吸取C液2.0mL,置1000mL容量瓶中,用蒸馏水定容,混匀。准确吸取2mL样品溶液(吸取量依样品中淀粉浓度而变),置15mL具塞刻度试管,加入碘液0.2mL,直至溶液呈现透明蓝色,用蒸馏水补足到10mL,混匀,静置10min,于660nm波长处测定消光值。由标准曲线查出样品中淀粉含量(g/100g鲜重)。
四、计算
A
G(g/100g鲜重)= ———— ×稀释倍数×100
6
W×10
式中:G——样品淀粉含量(g/100g鲜重)
A——从标准曲线查得的样品淀粉含量(μg/mL) W——样品重(g) 五、注意事项
(一)若样品含淀粉浓度高时,加碘液后会出现极深的蓝色而无法比色时,就须将溶液重新稀释后再进行测定。
(二)若样品含淀粉量太少时,加碘液后不呈现蓝色,可适当加大样品用量。