开菲尔中菌种分离与鉴定方法初探(2)

发布时间:2021-06-07

在每个保藏菌株的试管中各取一环菌体每种糖做3个平行发酵管根据糖发酵

实验的结果

1.4.4 菌种复筛

将选取的菌株接种到不同的生理生化培养基中

1.4.4.1 吲哚实验

将选取的菌株接种到蛋白胨液体培养基中

在各管中加入乙醚0.5–1ml

然后沿管壁缓缓加入数滴吲哚显色剂

则在乙醚层出现玫瑰红色

以“+”表示P实验

将选取的菌株接种到葡萄糖蛋白胨培养基中

培养24~48h ¼Ó2ml氢氧化钠约0.5~1mgÈ»ºó¼¤ÁÒÕñµ´ÊÔ¹ÜÒÔ±£³ÖÁ¼ºÃͨÆøÈôÅàÑøÒº³ÊºìÉ«ÕßΪÑôÐÔ·´Ó¦

P实验培养液中观察其变化培养液呈红

色不变为阳性

若有硫化氢产生

1.4.4.5 明胶液化

挑取18~24h待试菌培养物

于20~22不摇动再观察其是否被细菌液化

即为试验阳性

用稀释平板法测定其菌数

下培养24h,计数则为阳性

1.4.4.7 耐盐性

将待测菌稀释到一定程度

然后在稀释液中加入6.5培养24h,计数则为阳性

1.4.5 菌种鉴定

根据糖发酵试验结果结合菌株的个体形态和菌落形态参照文献[1,2,3]对选择出来的菌

种进行鉴定

经染色镜

检后得知其中个体形态为短杆状的共17株

含芽孢球状菌30株产膜菌8株

发酵结果

以3

个平行中的多数为准不发酵乳糖的菌株

2

产生芽孢的菌株

视同一种菌株

表1为15种糖发酵实验选择出

的菌株

  + ^   

  

3 酵母

+ ^ + ^ + ^ d +

5

球菌

+

^ + ^ + ^

d d

8

酵母

+

^ +

+ ^

d

10 短杆菌 +

^ + ^ + ^

^

d

12

球菌

+

+ ^

14 球菌 + ^ + ^ +

为阳性反应为阴性反应

为产气

除反应相同的菌株

分别为2

号球菌12

号球菌

培养特征及各主要生理生化实验结果查参考文献[57]

鉴定菌种

71

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