开菲尔中菌种分离与鉴定方法初探(2)
发布时间:2021-06-07
发布时间:2021-06-07
在每个保藏菌株的试管中各取一环菌体每种糖做3个平行发酵管根据糖发酵
实验的结果
1.4.4 菌种复筛
将选取的菌株接种到不同的生理生化培养基中
1.4.4.1 吲哚实验
将选取的菌株接种到蛋白胨液体培养基中
在各管中加入乙醚0.5–1ml
然后沿管壁缓缓加入数滴吲哚显色剂
则在乙醚层出现玫瑰红色
以“+”表示P实验
将选取的菌株接种到葡萄糖蛋白胨培养基中
培养24~48h ¼Ó2ml氢氧化钠约0.5~1mgÈ»ºó¼¤ÁÒÕñµ´ÊÔ¹ÜÒÔ±£³ÖÁ¼ºÃͨÆøÈôÅàÑøÒº³ÊºìÉ«ÕßΪÑôÐÔ·´Ó¦
P实验培养液中观察其变化培养液呈红
色不变为阳性
若有硫化氢产生
1.4.4.5 明胶液化
挑取18~24h待试菌培养物
于20~22不摇动再观察其是否被细菌液化
即为试验阳性
用稀释平板法测定其菌数
下培养24h,计数则为阳性
1.4.4.7 耐盐性
将待测菌稀释到一定程度
然后在稀释液中加入6.5培养24h,计数则为阳性
1.4.5 菌种鉴定
根据糖发酵试验结果结合菌株的个体形态和菌落形态参照文献[1,2,3]对选择出来的菌
种进行鉴定
经染色镜
检后得知其中个体形态为短杆状的共17株
含芽孢球状菌30株产膜菌8株
发酵结果
以3
个平行中的多数为准不发酵乳糖的菌株
2
产生芽孢的菌株
视同一种菌株
表1为15种糖发酵实验选择出
的菌株
+ ^
3 酵母
+ ^ + ^ + ^ d +
5
球菌
+
^ + ^ + ^
d d
8
酵母
+
^ +
+ ^
d
10 短杆菌 +
^ + ^ + ^
^
d
12
球菌
+
+ ^
14 球菌 + ^ + ^ +
注
为阳性反应为阴性反应
d
为产气
剔
除反应相同的菌株
分别为2
号球菌12
号球菌
培养特征及各主要生理生化实验结果查参考文献[57]
鉴定菌种
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