细胞培养及无菌操作(8)
发布时间:2021-06-06
发布时间:2021-06-06
你还在为没有做过细胞培养实验而烦恼吗?你还在为做细胞实验而痛苦吗?看了这个《细胞培养的有关名词及其概念》相信一定会释疑我的烦恼
(1)培养物是否被污染,主要观察培养液颜色的变化及混浊度。如培养液变为黄色且混浊,表示已经被污染。
(2)细胞生长状况与培养液颜色的变化,如培养液变为紫红色,一般细胞生长不好。可能是瓶塞未盖紧或营养液p
H过高。
(3)培养液若变为桔红色,一般显示细胞生长良好。
经过1~2天的培养后,若细胞生长情况较差或培养液变红了,则可换一次营养液。换液时也要注意无菌操作,
在酒精灯旁,倒去原培养液,再加入等体积的新配营养液,pH7.0。若经2~3天后,细胞营养液变黄,此时表示
细胞已生长。如果希望细胞长得更好些,此时也可换液,换液时,所用的营养液称为维持液,它与营养液的组成完
全相同,仅所用血清为5%。以后,每隔3~4天(视细胞液pH值而定)更换一次维持液。待细胞已基本长成致密单
层时,此时即可进行传代培养。
(4)如细胞已生长,则要观察细胞的形态特征并判断其所处的生长阶段。观察时,可参照以下(※)的描述进行。
(5)观察完毕,可用台盘蓝染液对细胞进行染色。以确定死活细胞的比例。
※细胞的生长阶段及形态特征
传代培养的细胞需逐日进行观察,注意细胞有无污染,培养液颜色的变化及细胞生长的情况。一般单层培养的
细胞,从培养开始,经过生殖、繁殖、衰老及死亡的全过程。它是一个连续的生长过程,但为了观察及描述,人为
地将其分为5个时期,但各期间无明显绝对界限。现分别描述如下:
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