异丙酚对肝脏缺血再灌注损伤时的保护作用

异丙酚对肝脏缺血再灌注损伤时的保护作用

安世芝 王月兰 郭鸿雁

中文摘要

【目的】缺血再灌注损伤是一重要的临床问题，可以涉及到临床各科。休克、感染、肝创伤及肝移植所引起的肝功能衰竭、肝切除后肝脏的再生及肝功能的恢复等都与肝缺血再灌注损伤（HIRI）有关。大量的研究证明，氧自由基产生增加、细胞内钙超载、细胞因子的参与、Kupffer细胞（Kupffer cell,KC）激活及中性粒细胞（polymorphonuclear leukocyte,PMN）的聚集等参与肝脏缺血再灌注的损伤，但其发生的机制和途径尚不清楚。

本研究旨在通过建立大鼠部分肝叶缺血再灌注模型，从分子生物学水平到电子显微镜的超微结构，从细胞浆炎症因子到细胞核转录因子DNA结合活性等方面系统地探讨肝脏缺血再灌注损伤的机理，并观察异丙酚对其影响，为防治围术期肝脏缺血再灌注损伤、寻找合理的麻醉药物，提供理论依据和新的切入点。

【方法】采用Kobayashi法建立Waster大鼠部分肝叶缺血再灌注模型，并将72只动物随机分为4组，正常对照组、缺血再灌注组、异丙酚4 mg组和异丙酚6 mg组，并分别于肝门阻断30min再灌注30min（T1）、阻断60min再灌注60min（T2）、阻断60min再灌注120min（T3）3个时点取颈静脉血和肝组织；采用双抗体夹心酶联免疫吸附法（ELISA）检测肿瘤坏死因子-a（TNF- a）和白细胞介素-10（IL-10）的活性与含量的变化；采用凝胶电泳迁移率法（EMSA）测定T2时点核转录因子-kB（NF- kB ）的DNA结合活性；投射电镜观察T2时点肝细胞超微结构以及细胞凋亡和线粒体能荷(energy charge)的改变。

【结果】1. 血清中的细胞因子含量变化 B组大鼠于肝门阻断后，随缺血再灌注时间的延长，血清TNF-a、IL-10水平水平显著升高，（P＜0.05），但于T2时点达高峰；C、D组与B组同一时点比较TNF-a水平有显著性降低（P＜0.05），IL-10水平显著升高(P＜0.05)；但C、D组之间各时点比较无显著性差异(P＞0.05)。

2. NF－KB的DNA结合活性（NF-KB-binding activity OR affinity） 肝门阻 作者单位：250001 济南市妇幼保健院麻醉科，山东大学硕士在读，电话13153037423（安世芝）；武汉市，华中科技大学同济医学院协和医院麻醉科（王月兰）；山东大学2003级硕士（郭鸿雁）