荧光分析法在生物领域应用(3)
发布时间:2021-06-06
发布时间:2021-06-06
大多数荧光反应都受溶液酸碱度的影响,故荧光分析需在适合的酸碱度溶液中进行。最适当的酸碱度必须由实验来确定。所用酸的种类也影响荧光的强度,例如,奎宁在硫酸溶液中的荧光较在盐酸中的要强些。
4.荧光分析法在生物领域的应用
4.1荧光分析法检测细胞活性
应用二乙酸荧光素(FDA)-溴化乙锭(EB)双染色同步荧光分光光度法测定细胞活性变化,灵敏度和特异性与普通荧光分光光度法相比较有所提高。方法:FDA-EB对已知比例的死、活细胞双染色,选择△入=40nm进行同步荧光扫描,与普通荧光分光光度法测定值进行比较。结果:该方法与通常的荧光法相比,灵敏度有较大提高,并能确定溶液中死、活细胞比例关系。结论:FDA-EB双染色同步荧光分光光度法可用于细胞活性变化的定性定量分析。[2] [3] [4]
4.2荧光分析法测定生物样品
通过电化学氧化肾上腺素,使其生成羟基吲哚类荧光物质(λem=490nm),实现了药物中肾上腺素含量的电化学氧化-荧光检测。研究结果表明,荧光强度与肾上腺素浓度分别在2.00×10-7—1.00×10-6mol/L和1.00×10-6—4.00×10-5mol/L范围内呈良好的线性关系,检出限为6.70×10-8mol/L。该方法用于药物制剂中肾上腺素含量的测定,相对标准偏差小于1.88%(n=7),加标回收率为88.4%—116.6%。[5] [6] [7] [8]
4.3荧光分析法研究生物群落动态
目前常用于分析色素浓度的分光光度法灵敏度较低,当样品中色素含量很低时,难以检出[9]。也有研究曾经采用了同步荧光法测定了海洋浮游植物的叶绿素[10],但至今还未见用于湖泊底泥中色素分析的报道。Yuk等人应用高效液相色谱(HPLC)法分析了Baikal湖湖泊沉积物中的色素L,该方法检测限很低,灵敏度极高。但此法样品前处理过程较为复杂,且成本较高。而荧光分析法灵敏度较高,所需样品量少,更为简便、快速和经济。虽然蓝藻一般在夏季形成水华,但是认识藻类在底泥中初春的动态规律有助于了解水华形成的机理。以太湖梅梁湾地区的底泥为材料,利用荧光分析法测定藻蓝素含量,并用同步荧光分析法同时测定湖泊底泥中的叶绿素a、叶绿素b含量,目的是利用不同色素的定量分析来表征底泥中不同类群藻类的比例,为探讨不同季节底泥中水华蓝藻存在状态与春季蓝藻复苏以及随后水华发生的时空关系提供技术支持。
4.4药物小分子与生物大分子的相互作用
上一篇:南北朝民歌
下一篇:小学英语学习习惯的培养