(医学版)

复旦学报FudanUnivJMedSci2010Nov,37(6)

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脂肪干细胞构建组织工程化角膜基质组织

鲍慧婧 邹 俊

1

1

尹 烁 崔 磊

22

上海 200235)

(1上海交通大学附属第六人民医院眼科 上海 200233;2上海组织工程研究与开发中心

摘要! 目的 探讨以可降解高分子材料聚羟基乙醇(polylactic co glycolicacid,PLGA)为支架,复合自体脂肪干细胞构建组织工程角膜基质修复角膜基质层缺损的可行性。方法 兔脂肪干细胞(rabbitadiposederivedstemcells,rASCs)培养至第4代接种在PLGA载体支架上,扫描电镜观察细胞在支架上生长黏附情况。体外培养7天后将rASCs PLGA复合物回植到角膜基质缺损模型的兔角膜基质层间,术后第12周和24周取材行组织学和透射电镜超微结构观察。未接种细胞的PLGA材料移植基质层间作为对照组。结果 细胞在PLGA支架上生长增殖良好,实验组移植术后12周材料降解,角膜基本恢复透明。组织学检查显示移植后24周新生角膜基质样组织与正常角膜基质组织相似,电镜下胶原纤维直径与正常角膜基质组织比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论 脂肪干细胞可作为种子细胞来源用于构建组织工程角膜基质。 关键词! 脂肪干细胞; 组织工程; 角膜; 基质; 聚羟基乙醇; 兔 中图分类号! Q813.1;R779.65 文献标志码! A

Tissueengineeringofcornealstromawithadiposederivedstemcells

BAOHui jing1,ZOUJun1,YINShuo2,CUILei2

(1DepartmentofOphthalmology,ShanghaiSixthPeople sHospital,ShanghaiJiaotong

University,Shanghai200233,China;ShanghaiTissueEngineeringResearch

andDevelopmentCenter,Shanghai200235,China)

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Abstract! Objective Toexplorethefeasibilityofusingautologousrabbitadiposederivedstemcells(rASCs)forcornealstromaldefectrepairingwithbiodegradablepolylactic co glycolicacid(PLGA)asscaffold. Methods ASCsisolatedfromrabbitlipoaspiratewereculturedtopassage4andseededonPLGAtofabricatecell PLGAconstructs.Scanningelectronmicroscopewasusedtoobservetheadhesionandproliferationofcellsonscaffold.After1weekofcultivationinvitro,theconstructwasimplantedintorabbitcornealstroma.Thetissueengineeredcorneawasobservedandharvestedforhistologicalevaluationandtransmissionelectronmicroscopy(TEM)examinationat12weeksand24weeksaftertransplantation.TherabbitsimplantedwithPLGAscaffoldalonewithoutcellswereservedascontrol. Results rASCsattachedfirmlyandgrewwellonthescaffoldinvitro.ThePLGAmaterialwasdegradedandthecorneawasnearlytransparentat12weeksaftertransplantationinvivo.Histologicalstructureoftissueengineeredcorneawasrelativelysimilartothatofnormalcorneaat24weeksaftersurgery.Thediameterofcollagenfibrilsobservedbytransmissionelectronmicroscopyshowednosignificantdifferencewiththatofnormalstroma. Conclusions Autologousrabbitadiposederivedstemcells(rASCs)couldbeseedcellsforconstructingtissueengineeredcornealstroma.

Keywords! adiposederivedstemcells; tissueengineering; cornea; stroma; polylactic co glycolicacid; rabbit

角膜病是目前主要的致盲性疾病之一,角膜移植手术是当前治疗重症角膜疾病的有效方法,但是角膜供体的严重匮乏限制了角膜移植的广泛开展。随着组织工程技术的日新月异,组织工程角膜已成为眼科

上海市自然科学基金项目(08ZR1411400)

研究领域中的热点[1]。角膜基质是角膜组织的重要组成部分,约占角膜厚度的90%,是维持角膜透明的重要组织结构。虽然我们曾利用角膜基质细胞作为种子细胞成功构建了组织工程化角膜基质[2],但角膜

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