TIANGEN产品DP315-TIANamp病毒基因组DNA RNA提取试剂盒
时间：2025-04-20
TIANGEN产品DP315-TIANamp病毒基因组DNA RNA提取试剂盒说明书
产品简介
本试剂盒采用可以特异性结合病毒DNA/RNA的离心吸附柱和独特的缓冲液系统，适用于从200 μl血浆/血清/淋巴液中提取病毒的DNA/RNA，该试剂盒配备了Carrier RNA用于充分收集微量DNA/RNA。离心吸附柱中采用的硅基质材料为本公司特有新型材料，高效、专一吸附DNA/RNA，可最大限度去除杂质蛋白等。提取的病毒DNA/RNA纯度高，质量稳定可靠，可适用于各种常规操作，包括酶切、PCR、文库构建、Southern杂交等实验。
注意事项 请务必在使用本试剂盒之前阅读此注意事项。
1. 所有的离心步骤均在室温下进行（15-25 ℃）。2. 将样品平衡至室温。
3. 试剂盒中提供的RNase-Free离心管（1.5 ml）供第13步洗脱步骤使用，其余离心管需自
备。
4. 使用前请按瓶上标示，向装有15 ml RW溶液的试剂瓶中加入60 ml无水乙醇，混匀后使
用。
Carrier RNA溶液的配制如下：
●
向装有310 μg Carrier RNA冻干粉的管子中加入310 μl RNase-free ddH2O，
将Carrier RNA彻底溶解，得到终浓度为1 μg/μl的溶液，并按实验情况分装到RNase-Free的离心管中，置于-20 ℃储存。使用时按照提取的次数取出相应的溶液，该溶液应避免反复冻融，冻融次数不能超过3次。
●
注意Carrier RNA冻干粉不能直接溶解于缓冲液GB中，必须先溶解在RNase-Free ddH2O中，再溶解至缓冲液GB中。
●
溶液的体积 （见表1或使用以下公式计算），将缓冲液GB与Carrier RNA溶液颠倒混匀，即得到Carrier RNA工作液；为避免溶液出现起泡现象，请勿使用涡旋振荡。 如果需要提取大量的样品，可根据以下公式计算：
n×0.22 ml =y ml y ml×28 μl/ml=z μl
n=同时提取的样品个数，y=需要加入缓冲液GB的体积，z=需要加入Carrier RNA溶液的体积
表1 步骤3中Carrier RNA工作液的配制
样品
Carrier RNA
样品
Carrier RNA
个数 GB(ml)
水溶液(μl) 个数 GB(ml)
水溶液(μl) 1
0.22
6.2
13
2.86
80.1
2 0.44 12.3 14 3.08 86.3 3 0.66 18.5 15 3.30 92.4 4 0.88 24.6 16 3.52 98.6 5
1.10 30.8 17 3.74 104.7 6 1.32 37.0 18 3.96 110.9 7 1.54 43.1 19 4.18 117.0 8 1.76 49.3 20 4.40 123.2 9 1.98 55.4 21 4.62 129.4 10 2.20 61.6 22 4.84 135.5 11 2.42 67.8 23 5.06 141.7 12
2.64
73.9
24
5.28
147.8
注意：请将缓冲液GB与Carrier RNA溶液颠倒混匀，即得到Carrier RNA工作液；为避免溶液出现起泡现象，请勿使用涡旋振荡。
操作步骤
1. 用移液器将20 μl Proteinase K加入一个干净的1.5 ml离心管中。2. 向离心管中加入200 μl血浆/血清/淋巴液（样品需平衡至室温）。
注意：如果样本体积小于200 μl，可加入0.9% NaCl溶液补充。
3. 加入200 μl Carrier RNA工作液（为缓冲液GB与Carrier RNA溶液的混合液，配制方法如
表1或按照公式计算）。盖上管盖，涡旋振荡15 sec混匀。
注意：为了保证裂解充分，样品和Carrier RNA工作液需要彻底混匀。4. 在56℃孵育15 min。简短离心以收集附着在管壁及管盖的液体。
TIANGEN产品DP315-TIANamp病毒基因组DNA RNA提取试剂盒说明书
5. 加入250 μl无水乙醇，此时可能会出现絮状沉淀。盖上管盖并涡旋振荡15 sec，彻底混
匀。在室温（15-25℃）放置5 min。
注意：如果周围环境高于25℃, 乙醇需要再在冰上预冷后再加入。6. 简短离心以收集附着在管壁及管盖的液体。
7. 仔细将离心管中的溶液和絮状沉淀全部转移至RNase-Free吸附柱CR2（吸附柱放在收集
管中），盖上管盖，8,000 rpm (~6,000×g) 离心1 min，弃废液，将吸附柱放回收集管中。
注意：如果吸附柱上的液体未能全部离心至收集管中，请加大转速，延长离心时间至液体完全转移到收集管中。
8. 小心打开吸附柱盖子，加入500 μl溶液GD（使用前请先检查是否已加入无水乙醇），盖
上管盖， 8,000 rpm (~6,000×g)离心1 min，弃废液，将吸附柱放回收集管。
9. 小心打开吸附柱盖子，加入600 μl溶液PW（使用前请先检查是否已加入无水乙醇），盖
上管盖，静置2 min，8,000 rpm (~6,000×g)离心1 min，弃废液，将吸附柱放回收集管。10. 重复此步骤一次。
11. 小心打开吸附柱盖子，加入500 μl无水乙醇，盖上管盖，8,000 rpm (~6,000×g)离
心1 min，弃废液。
注意：乙醇的残留可能会对后续实验造成影响。
12. 将吸附柱放回收集管中，12,000 rpm (~13,400×g)离心3 min，使吸附膜完全变干，弃废
液。
13. 将吸附柱放入一个RNase-Free离心管（1.5 ml）中，小心打开吸附柱的盖子，室温
放置3 min，使吸附膜完全变干。向吸附膜的中间部位悬空滴加20-150 μl RNase-Free ddH2O，盖上盖子，室温放置5 min。12,000 rpm (~13,400×g)离心1 min。
注意：确保洗脱液（RNase-Free ddH2O）在室温平衡后再使用。如果加入洗脱液的体积很小(小于50 μl)，为了将膜上的DNA/RNA充分洗脱下来，应注意将洗脱液加到膜的中央位置。洗脱体积可以根据后续的实验要求灵活处理。
Order: 010-59822688
Toll-free: 800-990-6057 /400-810-6057TIANGEN BIOTECH (BEIJING) CO., LTD
版本号: DP130423
TIANamp Virus DNA/RNA Kit病毒基因组DNA/RNA提取试剂盒
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