ErbB2通过FAK—Src—MAPK信号通路诱导细胞转化和移

中国病理生理杂志

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26 33

[文章编号] 10 4 1 ( 0 8 1 2 6 0 0 0— 7 8 2 0 )2— 33— 3

E b 2通过 F rB AK—S c—MA K信号通路 r P

诱导细胞转化和移动侵袭.

何强，梁力建，彭宝岗，李绍强，汤地，阿力亚 (中山大学附属第一医院肝胆外科，广东广州 5 0 8 ) 10 0

[摘

要]目的： 探讨表皮生长因子受体 2 Eb2诱导肿瘤转化和侵袭的分子机制。方法： (r ) B用表达 Eb 2 rB

逆病毒颗粒感染 F K细胞， s r印迹检测 E b 2在 F K“ A Wet e n rB A细胞中的表达，免疫沉淀检测 Eb 2的功能。用 rB Sc r阻断剂一P 2阻断 Sc用 MA K阻断剂一U 16阻断 MA K, P r, P O2 P观察 Sc M P r或 A K被阻断后对 Eb 2诱导的细胞 rB移动和细胞转化的影响。结果：感染后 Eb 2在 F K细胞中稳定表达和激活。P 2抑制 E b 2诱导的 F K磷 rB A P rB A酸化以及 Eb 2诱导的细胞移动。U 16阻断 Eb 2诱导的 MA K磷酸化以及 Eb 2诱导的细胞锚定依赖性生 rB O2 rB P rB存一细胞转化。结论： rB Eb 2通过 F K—Sc—M P A r A K信号转导通路诱导 F K细胞转化和移动。 A

【关键词]受体，表皮生长因子； A Sc M P F K— r— A K通路；瘤侵润肿[中图分类号] R 6 33[文献标识码] A

On o e i r n f r a i n,mi r t n a d i v sv n s fc l d c d b c g n c t a so m to g a i n n a i e e so el i u e y o snEr B2 a e m e i t d v a FAK—Sr b r da e i c— M APK inai t sg lng pa hwa y

H i g LA G L— in P N a E Qa, I N i j, E G B o—gn, I ho in, A G D, i a n a a g L a—qag T N i A L—y S( eatetfHp t iayS re,TeFr f it o i l S nY t snU i￣t, unzo 10 0 hn

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[ B T A A M:T x l etep si lyta Eb 2一idcdo cgnct nf m t nad i ai . A S R CTl I oepo os it h t rB r h bi n ue noe i r s r ai n n s ni a o o v o nv le F o v AK—S c—MAP sg a ig p t w y M ETHODS:P r n a AK r K in l ah a . n ae t F l c l r n e td b e r el we e if ce y r t s o—v co at l s e trp r c e i

e p e sn r B x r s i g E b 2.E p s in o r B n t n t n w r s a e y W e tr lt n n mmu o r cp ai n e p c x r so fE b 2 a d i f ci e e a s y d b s n bo t g a d i e su o e i n p e i tt,r s e - o t ey S n i i r P rMAP h bt rU 2 su e od tc r rMAP f n t n o b 2一i d c d c l o c— i l. r i h bt 2 o v e oP K i i i O1 6 wa s d t ee t c o n o S K ci n Er B u o n u e el n o g nc t n f r t n a d mir t n RES e i r so ma i g ai . a o n o ULTS:Er B so e e p e s d a d f n t n l c iae n F b 2 wa v r x r s e n u ci a y a t td i AK c l .Th ol v“ el s ep o p oy ain o A i d c d b r B a n ii d b P h s h rl t fF K u e y E b 2 w si h b t y P 2,a d t e i h bt n o AK y P 2 w sa s cae i o n e n h i i o fF n i b P a o itd w t i s h m—

p i d c l mi a in a d i v so . U 2 l c e h s h r lt n o ar el g t

n n a in e r o O1 6 b o k d p o p o ya i fMAP n u e y E b 2,a d W e p n il o o K id cd b r B n a r s o sb e t s i ar d a c o a e—d p n e tc l s r ia n s f a a . mp i n h r g e e e d n el u vv i ot g r CONCLUS ON:C l o c g nc t n f r ai n l I el n o e i r so a m t,mir t n n o g ai,a d oi v so n u e y E b 2 ae me it d v a F n a in id c d b r B r d ae i AK—S c—MAP i ai g p t w y r K sg l n ah a . n

[ Y WOR S R cpo, pdr a go t co; A KE D] eet eie l rwhf t F K—Sc—M P ah a; epam ivs e es r m a r r A K ptw y N ol ai ns s n v

表皮生长因子受体 2 Eb 2属于酪氨酸激酶袭是否通过 F K— r— A K信号通路。 ( rB ) A S MP c 受体。过量表达 Eb 2 rB与人体肿瘤的高侵袭性和预材料和方法后不良有密切关系¨。焦点黏链激酶 (oa d ein fcl hs a o kns, A是一个主要的焦点黏连蛋白，细胞生 1细胞株和细胞培养 iae F K)在存和迁徙过程中起重要的作用’。我们以前的研 小鼠胚胎纤维原细胞 F K A 细胞培养于究表明，A F K在调节 Eb 2诱导的细胞生存、瘤形 D M, rB肿 ME该介质含有 1%胎牛血清 ( B ) 1m o/ 0 F S、 m lL 1链霉素。 成和侵袭等方面起着重要的作用，机制可能涉及丙酮酸、%非必需氨基酸以及青/其到 F K—Sc A r—MA K转导途径。本实验使用 Sc 2抗体和试剂 P r、 M P A K阻断剂分别阻断 F K蛋白作用分子 S A r c和 A t— rB一 ( b一3 coe3 5购自 O c— ni Eb 2 A, l B ) n no M P通过观察 S A K, r MP c和 A K信号对于细胞转化和 gn;ni A ( e e at—F K A一1 7,C一2 )自 S n rz 0购 a t Cu; a移动的影响而阐明 Eb 2诱导的细胞转化和移动侵 a t— h sh t

oiea t o y( G1 ) at h sh rB ni p op o rs ni d 4 0和 ni op o y n b p[收稿日期] 07 1— 4 20— 1 1E—ma l h q a g h t i c m i:l e in@ o mal o .

[回日期] 08 0— 9修 20— 2 2

[基金项目]广东省自然科学基金资助项目( o7068 N .0 13 )

一

MA K( 2 4 )及 MA K( 2 4购自 U s t; P 4/4以 P 4/ 4) pt e a

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H rg l ( R购自 N o ak ro eeui H G) n em res 3细胞转染

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应用表达 Eb 2受体并带有强化绿荧光蛋白 rB(n a cdgenf oecn rt n E F ) eh n e re urset oe, G P的双顺反 l p i

子逆载体方法稳定转染 23包装细胞， 9产生重组逆病毒颗粒。用 A 2一 rB P Eb 2逆病毒颗粒重组体转导细胞。于 2 4孔培养板中每孔植入 2 1× 0细胞，加入浓缩 10倍的逆病毒， 0连续感染 3d 。稳定转导细胞的进行扩增。4 We en印迹和免疫沉淀( i m o rc i f n 1 ) sr t hl n pei ti,1 t pa o '

F g 1 Er B so e e p e s d a d a t ae n F i b 2 wa …… 此处隐藏：10382字，全部文档内容请下载后查看。喜欢就下载吧 ……