中医药管理局标书(9)

时间:2025-07-10

二、研究内容(包括研究的具体方案、内容、方法等)

主要仪器: BIOMIAS 图像分析系统: 湖南中医药大学基础研究院

日本尼泰克 ACE919 型全自动生化分析仪。 法国 S-500P 半自动生化分析仪。 光镜:OLYMPUS BX50 日本产 电镜:日本 JEM-1010(HC)100KV 高衬度透射电子显微镜 3. 实验方法: 造模方法:造模组高糖高脂高胆固醇饲料喂养 2 个月后,禁食 12 小时,断尾 取血,血糖值为 16.7mmol/l-25mmol/l 者入选。造模成功后,各组恢复常规饮 食。 分组方法:动物购回,适应性喂养一周后,随机分成空白对

照组、模型对照 组、中药组、二甲双胍组、中药+二甲双胍组(n=6) ,除空白对照组外,其他动物 均用于造模。造模后,选择符合模型标准的大鼠分别随机分组如下:模型对照 组、中药组、二甲双胍组、中药+二甲双胍组,各组数量保持相等,每组均为 6 只。 给药方法:从造模成功后的第一天开始给药,疗程为 8 周。灌胃情况如下: 1 ○中药组:每日灌胃量相当于临床成人用药量的 10 倍,即 6ml/kg,每日 1 次, 共 8 周; 2 ○二甲双胍组:每日灌胃量相当于临床成人用药量的 10 倍,即 6ml/kg,每日 1 次,共 8 周; 3 ○中药+二甲双胍组:每日灌胃量相当于临床成人用药量的 10 倍,即 6ml/kg,每 日 2 次,共 8 周; 4 ○模型对照组:每日灌胃量相当于临床成人用药量的 10 倍,即 6ml/kg,每日 1 次,共 8 周; 5 ○空白对照组:每日灌相当于临床成人用药量的 10 倍的生理盐水,即 6ml/kg, 每日 1 次,共 8 周; 测试指标及取材 动物给药 8 周后,处死前 12h 禁食,股动脉取血约 4~5ml,其中 1.5ml

于 EDTA+抑肽酶的抗凝试管内,用做 ET 的检测。余血放置于试管内,离心取血 清,备做 NO、INS、TNF-α、TG、BUN、CREA、UA 的检测。立即取胰腺、肝脏、肾 脏病理切片:HE 染色;股动脉、腹主动脉病理切片:MASSON 染色 4.统计方法: 所有数据均采用 SPSS 统计软件进行统计分析。计量资料以均数±标准差( x ±S)表示。两样本均数比较采用成组 t 检验(One- Sample T Test) ,多样本均 数的两两比较采用单因素方差分析(one-way ANOVA) 。以 P<0.05 作为有显著性 差异。 5.技术路线: (附图于后) 实验开始前,随机抽取 6 只大鼠作为空白组对照组,并立即断头处死,取血 标本测定生化指标。然后迅速剥离取出双侧髂股动脉、腹主动脉、胰腺、肾脏用 生理盐水冲洗,10%福尔马林原位固定 24h,常规制片,动脉用 MASSON 染色,内 脏用 HE 染色,做光镜、电镜检查。造模成功后,选取成模大鼠,随机分成模型对 照组、中药组、二甲双胍组、中药+二甲双胍组。除模型对照组外,余组均给药。 治疗 8 周后,将全部大鼠处死,收集上述生化、放免及病理切片等各项指标。各 组为 6 只算入统计,认真详细记录所有数据。

技术路线附图如下:

购 入 清 洁 级 Wistar 大 鼠 40 只 , 适 应 性 喂 养 周。 1

取 6 只断头处 死 作为空白对照组

取血生化指标:FPG、TG、HDL、 TC。 取肝、胰、肾、股动脉、腹主动脉 做病理切片,准备光镜和电镜检

34 只大鼠喂高 糖 高脂高胆固醇饲 料 ( 10% 蔗 糖 ,

8 周后取 6 只 大鼠做 上述指 标

10% 猪 油 , 2.5% 胆固醇) ,共 8 周。

模型对照组

中药组

用药 8

周后各组分别处 死,测所有指标。

二甲双胍组

中药+二甲双胍组

统计指标,评估标 本,发表论文,实验 结束。

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